仪器分析课程中的毛细管电泳试验.PDFVIP

维普资讯 第19卷第4期 夫 化乎 2004年8月 仪器分析课程中的毛细管电泳实验 非水毛细管电泳同时分析环境水样中的无机阳离子 屈锋 林金明 (中国科学院生态环境研究中心 北京 100085) 摘要 介绍一个快速、简单、实用的毛细管电泳实验，适用于仪器分析课程中的毛细管电泳实 验教学。通过实验有助于学生理解酸度对电渗流的影响，有机酸络合剂对金属离子分离的影响， 了解直接检测和间接检测等概念，并学习电泳淌度的计算方法。 ． 随着科学技术的飞速发展，出现了许多新的仪器分析方法。毛细管电泳在过去的20年间 得到迅速发展，在各行业的应用不断增加，在21世纪分析化学中占有重要地位。在我国的高 等院校中，目前使用的教材和实验指南中很少包含毛细管电泳的内容。为使高等院校的学生 了解科学前沿和掌握最新技术，有必要在仪器分析教材和教学过程中介绍这种新的分析技术 和方法。 本文内容为作者研究成果的一部分。在甲醇溶液中，对常见9种金属离子和NH4可在 10min内进行分离。将该实验作为毛细管电泳仪器分析实验进行介绍，有助于学生了解毛细 管电泳分析技术中的一些基本概念以及实际应用。本实验所用的试剂价廉、易得，操作过程简 单，分析过程快速，可在一般实验室内完成。该实验容易为教师和学生所接受，可作为高等院 校分析化学等相关专业的仪器分析实验内容。 1 实验目的 了解毛细管电泳分离的基本概念和原理；掌握金属离子电泳淌度的计算方法；了解酸度对 电渗流、络合剂对金属离子分离的影响；理解直接和间接检测的概念；了解非水毛细管电泳在 分离环境水样中金属离子的应用。 2 实验原理 2．1基本概念 电泳：在电解质溶液中，带电粒子在电场作用下向其所带电荷相反方向迁移的现象。 毛细管电泳：以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，根据样品中各组分之间迁移速 度的差异而实现分离的一类液相分离技术。 淌度：电化学中把单位电场强度下离子的平均电泳速度称为淌度。 有效淌度：离子在实际溶液中测得的淌度。与溶液的性质和离子的形状、半径、电荷数等 有关。 44 维普资讯 电渗淌度：电渗流的淌度，与实际溶液的组成和性质等有关，由中性分子的迁移时间确定。 表观淌度：毛细管电泳中，离子在实际电泳过程中的淌度称为表观淌度，其大小等于离子 的有效淌度 和电渗淌度 。的矢量和，即 = 。± 。与电渗流同方向迁移的离子，表观 淌度大于电渗流淌度。与电渗流反方向迁移的离子，表观淌度小于电渗流淌度。 电渗淌度 = (1) 表观淌度 =2／ (2) 有效淌度 。=x／一 (3) 以上各式中，。代表电渗淌度，f。代表中性物质的迁移时间(s)，。代表离子的有效淌度， t代表金属离子的迁移时间(s)。 为分离电压(V)，为毛细管总长度(em)，f为毛细管有效 长度(进样端到检测窗口处长度，em)。 2．2 实验原理 在石英毛细管内，当电解质溶液pH大于3时，管壁的硅羟基一SiOH解离为一SiO一，管壁 带负电荷，电解质溶液中的阳离子被吸引到管壁附近，形成双电层。在外加电场作用下，毛细 管中的电解质溶液整体向阴极移动，这种现象称为电渗现象，整个液体的流动称为电渗流 (EOF)。电渗流是毛细管电泳分离的驱动力，在毛细管电泳中，离子在电场中的迁移速度不仅 决定于离子的有效淌度和电场强度，而且与电渗流速度有关。由于电渗流的作用，在一次电泳 操作过程中可以同时完成阳离子、阴离子的分离。一般情况下，电渗流由正极流向负极，电渗 流速度较电泳速度大，二者约为同数量级，所以能实现所有样品组分的同向移动。电渗流可以 带动阳离子，中性物质和阴离子以不同速度依次从负极端流出，这与传统的电泳不同。