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丙酮介质中辣椒素酯的酶催化合成动力学研究-分子催化

 第25卷 第3期 分  子  催  化 Vol.25,No.3   2011年6月 JOURNALOFMOLECULARCATALYSIS(CHINA) Jun. 2011  文章编号:10013555(2011)03027605 丙酮介质中辣椒素酯的酶催化合成动力学研究 1,2 1 3 1 刘 绍 ,刘卉琳 ,董新荣 ,谢达平 (1.湖南农业大学 生物科技学院,湖南 长沙410128; 2.湖南农业大学 食品科技学院,湖南 长沙410128; 3.湖南农业大学 理学院,湖南 长沙410128) 摘 要:对脂肪酶在丙酮介质中催化香草醇和壬酸甲酯合成辣椒素酯的反应动力学进行了研究.以HPLC方法测 定酶催化合成产物辣椒素酯的浓度,确定了反应初速度;采用双倒数作图分析法和产物抑制试验法研究了本合成 反应的机制,结果表明辣椒素酯的酶催化合成是按乒乓反应机制进行的.研究还确定了酶反应动力学方程和 V 、K 、K 的值,并对其进行了验证,结果表明动力学方程与试验结果拟合度达0.997. max mA mB 关 键 词:辣椒素酯;酶催化反应;脂肪酶;有机介质;动力学 中图分类号:Q555+.3;O643.32   文献标识码:A   辣椒素酯类物质(Capsinoids)是结构类似辣椒 化合成条件,我们在有机相中通过酶催化反应合成 [1,2] 素(Capsaicin)的酯类物质 ,生物活性与辣椒素 了系列香草醇酯类物质,并对酶催化合成条件进行 类似,具有抗疲劳、促进能量代谢、增强免疫力等 了初步优化[6,7].如能进一步阐明其反应动力学特 作用,其细胞毒性比辣椒素低,受到人们的广泛重 性,对控制酶催化反应和充分利用酶催化性质,提 视[3-6].天然辣椒素酯资源有限,分离纯化困难, 高酶催化的转化率,合理设计生产中的投料、工艺 于是人们对其合成进行了不少的研究.以脂肪酸酰 以及反应器,降低生产成本等有极大的参考意义. 氯与香草醇酯化等化学方法进行合成,产物复杂、 本文对脂肪酶于有机介质中催化香草醇和壬酸甲酯 产率低.以脂肪酶催化合成辣椒素酯的反应具有专 合成壬酸香草醇酯(辣椒素酯)的反应动力学进行 一性强、条件温和、收率高、环境友好、能耗低等 了探讨.其反应如图1所示. 优点,应用前景相当好.为了探讨辣椒素酯的酶催 图1辣椒素酯的酶法合成反应 Fig.1TheLipaseCatalyzedSynthesisreactionofCapsinoids 细化工研究所;Capsaicin为Sigma公司产品;甲醇 1材料与方法 为色谱纯;二次蒸馏水;柱层析硅胶(青岛海洋化 1.1材料 工公司);其他均为分析纯试剂.正壬酸甲酯为本 脂肪酶Novezymes435为丹麦 Novodisk公司产 实验室以正壬酸与甲醇为原料合成. 品;香草醇(纯度>97%)购于石家庄市东联南开香 1.2仪器 料开发有限公司;正壬酸(AR)购于天津市光复精 AL204电子天平为梅特勒托利多仪器(上海) 收稿日期:20110318;修回日期:20110423. 基金项目:湖南省自然科学基金项目(07JJ6026). 作者简介:刘 绍,男,生于1968年,博士生,副教授. 通讯联系人,Email:xinrong108@yahoo.c

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