银杏叶提取物对大鼠脑缺血 再灌注损伤诱导型一氧化氮合酶和B 细胞淋巴瘤白血病 2 相关X 蛋白表达的影响.pdf

１·３８ · 中华脑科疾病与康复杂志（电子版）２０１１年１２月第１卷第２期　ＣｈｉｎＪＢｒａｉｎＤｉｓＲｅｈａｂｉｌ（ＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＥｄｉｔｉｏｎ），Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２０１１，Ｖｏｌ．１，Ｎｏ．２ ·基础研究· 银杏叶提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤 诱导型一氧化氮合酶和 Ｂ细胞淋巴瘤／ 白血病２相关Ｘ蛋白表达的影响 付庆林　张新中　王崇军　韩培立　曾萍 　　【摘要】　目的　探讨银杏叶提取物（ＥＧｂ７６１）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤 的保护作用及其机制。方法　将８０只清洁级雄性ＳＤ大鼠制作大鼠右侧大脑中动脉 缺血再灌注模型。随机分为两组：对照组（Ａ组，给予生理盐水治疗，４０只），银杏叶提 取物干预组（Ｂ组，给予等量的银杏叶提取物，４０只），每组再分４个亚组，即再灌注后 １、３、６及２４ｈ组，每个亚组１０只。应用ＨＥ染色法观察大鼠脑组织形态学变化及免疫 组化ＳＡＢＣ法检测诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）在脑组织中的表达；应用逆转录聚合 酶链反应（ＲＴＰＣＲ）法检测凋亡基因对Ｂ细胞淋巴瘤／白血病２相关Ｘ蛋白（Ｂａｘ）表 达的影响。所有数据采用ＳＰＳＳ１３．０软件进行统计学分析。结果　（１）ＨＥ染色：Ａ组 发现明显的梗死灶、神经细胞坏死、凋亡以及神经细胞外形难以辨认，大部分细胞结构 消失。Ｂ组形态相对正常，损伤较Ａ组轻。（２）ｉＮＯＳ免疫组化结果：缺血再灌注１ｈ后 可见少量ｉＮＯＳ阳性表达细胞，３、６及２４ｈ可见ｉＮＯＳ的阳性表达细胞明显增多，并且 开始出现核移位现象，包括神经元、神经胶质细胞、血管内皮细胞等，各时间点（１、３、６ 及２４ｈ）ｉＮＯＳ的阳性表达 ＩＯＤ值分别为 １８５１．３８±２４２．１２，２００５．４１±２９０．５２， ２６２５．２８±３８５．２１，３１４２．５±４２５．７２，Ａ组分别为 １９５０．２５±２９８．２６，２２３２．４５±３０５．２８， ３２５１．２２±４２５．２６，３９６５．３６±５２１．６２，可见，３ｈ后同时间点Ｂ组表达量显著低于Ａ组 （Ｐ＜０．０５）。（３）ＲＴＰＣＲ检测显示ＢａｘｍＲＮＡ表达水平在各时间点Ｂ组（ＩＯＤ值分别 为０．２６±０．０２，０．３０±０．０２，０．４２±０．０３，０．５３±０．０５）显著低于Ａ组（ＩＯＤ值分别为 ０．３３±０．０２，０．４５±０．０４，０．５９±０．０５，０．７３±０．０５；Ｐ均 ＜０．０１）。结论　ｉＮＯＳ和 Ｂａｘ在大鼠脑缺血再灌注后均显著增高。银杏叶提取物可能通过抑制ＰＡＦ和Ｂａｘ的 表达减轻脑缺血再灌注损伤，银杏叶提取物对大鼠缺血再灌注后的脑组织有显著的保 护作用。 【关键词】　银杏叶提取物；缺血再灌注损伤；细胞凋亡；Ｂ细胞淋巴瘤／白血病２ 相关Ｘ蛋白；诱导型一氧化氮合酶 Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａｅｘｔｒａｃｔｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｉｎｄｕｃｉｂｌｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ ａｎｄＢｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ／ｌｅｗｋｍｉａ２ａｓｓｏｃｉａｔｅｄＸｐｒｏｔｅｉｎａｆｔｅｒｆｏｃａｌｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｒａｔｓ　ＦＵＱｉｎｇｌｉｎ，ＺＨＡＮＧＸｉｎｚｈｏｎｇ，ＷＡＮＧＣｈｏｎｇｊｕｎ，ＨＡＮＰｅｉｌｉ， ＺＥＮＧＰｉｎｇ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＳｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＸｉｎｘｉａｎｇ ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｅｉｈｕｉ４５３１００，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡＮＧＸｉｎｚｈｏｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｘｉｎｚｈｏｎｇ１９５７＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ 　Ｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｅｘｔｒａｃｔｏｆ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＤＯＩ：１０．３８７７／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５１２３Ｘ．２０１１．０２．００６ 基金项目：中国博士后基金项目（５７０６８） 作者单位：４５３１００河南卫辉，新乡医学院第一附属医院心血管外科（付庆林、王崇军、韩培立），神经外科（张新中），ＩＣＵ （曾萍） 通讯作者：张新中，Ｅｍａｉｌ：ｘｉｎｚｈｏｎｇ１９５７＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ 中华脑科疾病与康复杂志（电子版）２０１１年１２月第１卷第２期　ＣｈｉｎＪＢｒａｉｎＤｉｓＲｅｈａｂｉ