实验八 家兔热原.pptVIP

实验八 家兔的给药、采血热原实验 【目的要求】 1、熟悉家兔的各种给药方法； 2、掌握家兔的耳缘静脉采血； 3、了解家兔热原反应的基本原理。 【基本原理】 临床上在进行静脉滴注大量输液时，由于药液中含有热原(注射剂中含有热原量达1ug /kg就可引起不良反应)，病人在0.5～1.0h内出现冷颤、高热、出汗、昏晕、呕吐等症状，高热时体温可达40℃，严重者甚至可休克，这种现象称为热原反应。 引起热原反应的主要原因是注射液或输液器中污染的热原所引起的。热原的致热量因菌种而异，如革兰阴性杆菌致热能力最强；由于注射途径不同，引起发热的程度也有所差异。 　由于家兔对热原的反应与人基本相似，目前家兔法仍为各国药典规定的检查热原的法定方法。 家兔体温变化十分灵敏，最易产生发热反应，发热反应典型、恒定，因此常选用家兔进行这方面的研究。反应过程：热原-白细胞-吞噬-白细胞崩解，释放内源性致热源-作用与体温调节中枢-产热增加，散热减少-体温上升。 内源性致热源 又称白细胞致热源，如白介素肿瘤坏死因子和干扰素等通过血-脑脊液屏障直接作用于体温调节中枢的体温调定点，使调定点上升，体温调节中枢必须对体温加以重新调节发出冲动，并通过垂体内分泌因素使代谢增加或通过运动神经使骨骼肌阵缩，使产热增多；另一方面可通过交感神经使皮肤血管及竖毛肌收缩，停止排汗，散热减少。这一综合调节作用使产热大于散热，体温升高引起发热。 【动物与器材】 　家兔（每组2只：1只用于热源实验，1只练习给药、采血和麻醉等）、台秤、动物肛门体温计、注射器、0.9%戊巴比妥钠、生理盐水、伤寒-副伤寒四联菌苗、２％２、４—二硝基酚、10%蛋白胨、消毒脱脂牛奶。 实验内容（１、家兔给药、麻醉） 1、静脉注射 兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。 先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。 实验内容（２、家兔采血） 1）耳缘静脉采血：将兔麻醉后固定，拔去耳缘静脉局部的被毛，消毒，用手指轻弹兔耳，使静脉扩张，用针头刺耳缘静脉末端，血液即流出。本法为兔最常用的采血方法，可多次重复使用。 2）颈静脉采血：将家兔麻醉后固定，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。 3）耳中央动脉采血：在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳，右手持注射器，在中央动脉的末端，沿着与动脉平行的向心方向刺入动脉，即可见血液进入针管。由于兔耳中央动脉容易痉挛，故抽血前必须让兔耳充分充血，采血时动作要迅速。采血所用针头不要太细，一般用6号针头，针刺部位从中央动脉末端开始，不要在近耳根部采血。 4）心脏采血：穿刺部位在第三肋间胸骨左缘1mm处，选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏，血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些，以免发生采血后穿刺孔出血。  实验内容（３、家兔热源实验） 【方法与步骤】 取适用家兔2只（提前停食12小时:降低家兔体能，加速应激反应发生），称量体重(1.5-3.0㎏)后，用肛门体温计测量家兔的正常体温(38.0～39.6℃)，一般测量两或三次，温差不得超过0.4℃。 采用以下方法之一进行热源实验： 1）于15min内自家兔耳缘静脉缓慢注射规定剂量（1.0～2.0ml/kg体重）伤寒-副伤寒四联菌苗，（供试菌苗温热至37℃，含量应不低于10亿/ml）； 2）皮下注射规定剂量（1.0ml/kg体重）2%的2、4—二硝基酚溶液（配制2、4—二硝基酚溶液时，需加10%NaOH少许，使溶液完全溶解）； 3）肌肉注射规定剂量(10.0ml /Kg体重)10%蛋白胨（温热至37℃的供试溶液）； 4）皮下注射消毒脱脂牛奶（3～5ml/kg体重）。 3、每隔20min按前法测其体温一次，共测五次，以5次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温升高度数。 4、将给药前后的每次体温测量结果记录下来，填于表内。 【注意事项】 体温计在插入肛门前，应先消毒体温计，甩动体温计使水银柱降到35℃以下，涂上润滑剂后才能使用； 肛门体温计插入各兔肛门的深度应相同（一般约6㎝左右或插至肛温37℃处），插入肛门的体温计，至少停留3—5分钟后才能取出； 供试家兔应尽可能处于同一温度环境中； 实验用的注射器、针头及一切供实验接触的器皿，应置烘箱中250℃加热30min或用