微囊藻毒素的总量分析及其氧化降解的特性研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 微囊藻毒素（microcystin ，MC ）是在蓝藻水华污染中出现频率最高、产生量最大和 造成危害最严重的一类藻毒素。MC 可以通过多种途径进入人体：饮用或接触受污染的 水体、食用受到污染的藻类保健品及在特殊情况下通过静脉输入等。MC 不仅可以在鱼 等动物体内蓄积，还可通过水产品进入人体，从而对人类健康造成潜在的威胁。MC 种 类繁多，目前发现的已超过80 种，毒性均类似微囊藻毒素LR （MC-LR ），但由于受到 标准品的制约，国内外对于MC 的研究多集中针对单种MC 的检测，对总量的研究较少。 为了全面反映MC 的污染水平，确保人类与动物的饮水安全，本课题选择气相色谱质谱 联用（GC/MS ）和液相色谱串联质谱 （LC-MS ），建立了三种环境基质中MC 总量的快 速分析检测方法，具体研究内容包括以下几个方面： 首先，建立了2- 甲基-3- 甲氧基-4-苯基丁酸（MMPB ）-气相色谱质谱联用（GC/MS ） 法测定水环境中MC 的总量。样品经固相萃取柱（SPE）萃取、富集、浓缩，洗脱液用 0.025 mol/L KMnO4 和饱和NaIO4 溶液在pH 9.0、T = 25 °C 条件下氧化1h，氧化产物用 氯甲酸甲酯进行甲酯化，经氯仿萃取后，取1.0 µL 进GC/MS 分析。通过监测质荷比为 4 （m/z ） 146.1 和91.0 的离子进行定量分析。该方法在浓度为2.5 µg/L - 1.0×10 µg/L 的范围内，峰面积与样品中MC 的总浓度呈良好的线性关系，方法的检出限为0.56 µg/L。 通过对15 个实际样品的分析，回收率在84.0% - 95.6% 之间，相对标准偏差 （RSD ）为 4.3% - 6.1% （n = 3 ），表明该方法适用于水环境中MC 总量的测定。 在上述工作的基础上，我们进一步探索了该方法在湖底沉积物MC 总量分析应用的 可行性，建立了MMPB- GC/MS 法测定湖底沉积物中MC 的总量。样品采用5% 乙酸 及甲醇溶液进行抽提并离心，经 SPE 富集纯化，洗脱液用0.050 mol/L KMnO4 和饱和 NaIO4 溶液在pH 9.0 条件下氧化1h。将氧化产物进行甲酯化，进GC/MS 分析。该方法 的检出限为7.0 ng/g，回收率在82.1% - 97.8% 之间，RSD 为3.9% - 6.7% （n = 3 ）。结果 表明该方法适用于湖底沉积物中的MC 总量的测定。 其次，为了简化MC 总量测定的操作我们又研究了无需甲酯化的液相色谱串联质谱 分析法。通过超高效液相色谱- 四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS ）测定 MMPB ，实现了蓝藻中MC 总量的测定。样品首先采用50% 乙酸及甲醇溶液进行抽提、 离心，上清液浓缩后用SPE 进行富集、纯化，洗脱液经0.050 mol/L KMnO4 和饱和NaIO4 溶液在pH 9.0 条件下氧化1h。以BEH C18 色谱柱进行梯度洗脱分离，通过监测质荷比 为 （m/z ）131.10 的离子进行定量分析。该方法在浓度为30.0 µg/L – 2000 µg/L 范围内， 峰面积与样品中MC 的总浓度呈良好的线性关系，方法的检出限为0.8 μg/L MC ，总量 的回收率在82.0% - 98.6% 之间，RSD 为2.7% - 6.5% （n = 3 ）。结果表明该方法适用于 蓝藻中MC 总量的测定。 最后，本文研究了MC 的氧化去除方法。以太湖水中含量最多的MC-RR 作为研究 对象，采用二溴海因 （1，3-二溴-5，5-二甲基海因，DBDMH ）对其进行氧化降解，反 应时间选择为5 min ，pH 值越低反应速率越高，二溴海因初始浓度为20 mg/L 为降解最 I