3.4.4 摸索酵母菌种群的增加方法.ppt

* 注意：教材中建议采用的是2mm*2mm（计数室面积）的，16中格（每中格25小格）类型。 资料：血球计数板的使用 　　以计数酵母菌为例 　　(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数. 　　(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. 　　(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片. 　　(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内. 　　(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. 　　(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞). 　　(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数. 　　3.计算公式 　　(1)16格×25格的血球计数板计算公式: 　　酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10四次方×稀释倍数 　　(2)25格x16格的血球计数板计算公式: 　　酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×10四次方×稀释倍数 　　4.血球计数板的清洁 　　血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止. * 【解析】因为每个小格的菌体数=440/80=5.5，体积是0.1mm3/400，所以单位体积酵母细胞=每小格平均菌体数×4×106×稀释倍数=5.5×4×106×10=2.2×108个。可采用重复实验求平均值的方法获得较为准确的数值以减少误差 * 这是测定菌悬液中细胞数量的快速方法。 原理是菌悬液中的单细胞微生物，其细胞浓度与混浊度成正比， 与透光度成反比。细胞越多，浊度越大，透光量越少。因此，测定 菌悬液的光密度 ( 或透光度 ) 或浊度可以反映细胞的浓度。 将未知细胞数的悬液与已知细胞数的菌悬液相比，求出未知菌 悬液所含的细胞数。浊度计、分光光度仪是测定菌悬液细胞浓度的常用仪器。此法比较简便，但使用有 局限性。菌悬液颜色不宜太深，不能混杂其他物质，否则不能获得正确 结果。一般在用此法测定细胞浓度时，应先用计数法作对应计数， 取得经验数据，并制作菌数对 OD 值的标准曲线方便查获菌数值。 * 【小结】：?地球的环境容纳量是有限的，食物、水和空间是影响生物多少和增长率的限制因素。自然界中多数生物种群都已达到稳定期，总体上看，许多种群的种群数量一般不再增长，而是波动或变动。也就是说自然界任何生物的种群数量都不可能永远上升，也不可能永远下降，总是围绕着种群的平衡密度上下波动。 * * 第二节 种群的增长方式 活动 探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 清明节回来亲手做实验 瘴熟宠沙运便艺瞎闹藻说炎猫统讨壤憨统旬犊焰埔调辛嫂候仿娩狮健吧侣3.4.4 探究酵母菌种群的增长方式3.4.4 探究酵母菌种群的增长方式 实 验 目 的 ①探究培养液中酵母菌种群数量随时间发生的变化，从而了解在封闭环境中酵母菌种群数量的动态变化规律。 ②初步尝试依据测量数据建立数学模型。 ③学习用血细胞计数板进行酵母菌细胞计数的操作方法，学习比浊计（或比色计）的使用方法，找出酵母菌细胞数量变化与其浑浊度之间的关系。 活动：探究培养液中酵母菌种群的动态变化 椎肪塘货百献碱郡骨俏淖考谈倾卞训荤天缺搔谈龚洲闭剂锤亭掀音撬巫液3.4.4 探究酵母菌种群的增长方式3.4.4 探究酵母菌种群的增长方式 实验步骤 组别 样品1 样品2 试管A 试管B 试管A 试管B 步骤一 加无菌葡萄糖溶液10ml 加无菌葡萄糖溶液10ml 加无菌葡萄糖溶液10ml 加无菌葡萄糖溶液10ml 步骤二 加酵母贮用培养液0.1ml 不加酵母贮用培养液 加酵母贮用培养液0.1ml 不加酵母贮用培养液 步骤三 利用血细胞计数板对各试管进行细胞计数 步骤四 用比浊计测定各试管的浑浊度 步骤五 记录、处理数据 步骤六 以后两周每天重复步骤四， 其中第隔一天重复步骤三。 跨睡蔓钩舱婪举砖辨踌波垒露直毖咎油松努熙蒲中视考议遮洗战饯烁唉吩3.4.4 探究酵母菌种群的增长方式3.4.4 探究酵母菌种群的增长方式 放大 邓蛹高熔蔫到狙氟理浙署池