截短型人乳头瘤病毒58型L1蛋白的表达及其体外生物活性研究.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # %’ (! ) (# 年 月 !# $ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 *+’, !# !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 截短型人乳头瘤病毒 型 蛋白的表达及其体外生物活性研究 ! #$ ， / ! / / / / / / 李文生 郑 瑾 刘红莉 陈宏伟 杨 军 王一理 司履生 / （西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所，环境与疾病相关基因教育部重点实验室，西安 $/4/） ! （西安交通大学陕西临床学院，西安 $/41） 摘 要 利用BCD 技术克隆截短型EB%51 F/ 基因并重组入杆状病毒表达系统穿梭质粒G67HI7A.EHJ，通过转座反 应，将目的基因片段重组入杆状病毒基因组，分离重组的I7A:;K L)M，并转染NO.0 昆虫细胞，收集被转染的NO.0 细 胞，提取细胞蛋白， 检测可见在大约 处出现一新生蛋白条带， 证实为 蛋白。用 NLN.BMP9 51QK7 R3H3S J’H EB%51F/ BSIK2T 纯化系统纯化所表达的蛋白。小鼠红细胞凝集试验证实纯化的蛋白可介导小鼠红细胞凝集，透射电镜观 察证实纯化蛋白可自组装成%FB。结果表明昆虫杆状病毒表达系统可高效表达截短型EB%51F/ 蛋白，纯化后的截 短型EB%51 F/ 蛋白在体外可自组装%FB，并具有介导小鼠红细胞凝集的生物学活性。 关键词 截短型 蛋白，昆虫 杆状病毒表达系统，蛋白纯化，病毒样颗粒 EB%51 F/ . 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） U$14 M /.-4/ !# #.5-4.# ［］ - 人乳头状瘤病毒（ ）是引起人类皮肤黏膜增 位的高危型 在中国仅排第 位 。鉴于高 EB% ! EB%/1 - 生性病变的一类 L)M 肿瘤病毒，高危型EB% 是人 危型EB%51 在我国妇女中感染的独特性，我们进行 类绝大部分子宫颈癌的重要启动因子，近年来的研 了EB%51 F/ 蛋白的表达，据报道 EB% F/ 蛋白的C 究发现高危型EB% 还可能与人类其它肿瘤有关，如 端截短并不影响其%FB 组装能力，而且还能增加表 ［，］ ［］ / ! # 喉癌、食管癌、口腔癌、鼻窦癌、膀胱癌、肺癌等 。 达水平