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浆膜腔积液粘蛋白定性实验
实验三 浆膜腔积液粘蛋白定性试验; 【目的】 掌握浆膜腔液粘蛋白定性(rivalta test , 李凡他试验)的方法。
【原理】 浆膜腔液漏出液中,只有微量的粘蛋白,李凡他试验为阴性。当炎症时浆腹腔上皮细胞被刺激,分泌粘蛋白增多。粘蛋白是一种酸性糖蛋白,等电点pH为3~5,因此,可在稀乙酸中出现白色沉淀。;【操作】
1.加试剂
2.加标本
3.观察结果
4.判断结果
5. 报告方式 ; 【注意事项】
1.血性浆膜腔积液经离心沉淀后,用上清液进行检查。
2.器材与试剂
(1)量筒的高度与蒸馏水的量要足够。
(2)根据漏出液主要成分制备基础液,在其中加入不同量的粘蛋白作为阳性对照。
(3)在量筒中加入冰乙酸及蒸馏水后应充分匀,否则会产生假阴性。
3.pH 保证pH3~5的酸碱度,加冰乙酸不宜过
多,以免pH远离浆膜粘蛋白的等电点产生假阴性。
; 4.结果判断
(1)加入标本后立即在黑色背景下仔细观察结果。如浑浊明显,下沉缓慢,中途消失者为阴性。
(2)标本中球蛋白含量增高时试验可呈假阳性,必要时可进行鉴别试验。实验方法:先将标本滴入未加冰乙酸的蒸馏水中观察,如有白色云雾状沉淀,此乃球蛋 白不溶于水所致。
5.结果分析 常用于漏出液与渗出液的鉴别。漏出液常阴性,渗出液常阳性。
6.本试验是一种初步的简易筛检试验,对区分渗出液与漏出液特异性意义不高。
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