多管发酵改良法在饮用水耐热大肠菌群检测中的应用.pdfVIP

· 3034· 中国卫生检验杂志 2014年 10月第24卷第20期 ChinJHeMthLabTec，Oct2014，Vol24，No20 · 经验交流 · 多管发酵改 良法在饮用水耐热大肠菌群检测中的应用 雷务年，黄华国，石威 ，谢艳芳 钦州市钦北区疾病预防控制中心，广西 钦州 535099 关键词 ：生活饮用水；总大肠茵群 ；耐热大肠菌群；多管发酵法 中图分类号：TS201．3 文献标识码 ：C 文章编号：1004—8685(2014)20—3034—02 我国生活饮用水标准中规定需同时检测总大肠 养：将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂 菌群和耐热大肠菌群且每 100ml水样中均不得检出。 (EMB)平板上，于 (36±1)℃培养箱内，培养 18h～ 由于总大肠菌群在人畜粪便中数量巨大，检测方法较 24h，观察菌落形态，挑取符合下列特征的菌落作革 为简单且概率高，对各种化学因子的抵抗力与肠道致 兰染色、镜检和证实试验：深紫黑色，具有金属光泽的 病菌相当所以被作为粪便污染的指标菌 1【3。目前检 菌落；紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落；淡紫红 测生活饮用水大肠菌群和耐热菌的方法有酶底物法、 色，中心色较深的菌落。(3)证实试验：经上述染色镜 PCR法、滤膜法等，但这些检测耐热大肠菌的方法技 检为革兰阴性无芽胞杆菌，同时接种乳糖蛋 白胨培养 术还不成熟 J。多管发酵法 (MZr)有实验步骤复杂、 液，置(36±1)oC培养箱内24h，有产酸产气者，即证 干扰因素多、检测时问长等缺点，但是更具有检测成 实为总大肠菌群。(4)耐热大肠菌群检验步骤：自总 本低、易于推广、原理简单及不受水质浊度的影响等 大肠菌群乳糖发酵试验中的阳性管 (产酸产气)中取 优点，在 目前国情下还有其存在 的长期性和必要 1滴转种于EC培养基 ，置44．5℃水浴箱中，培养18h 性 。在应用 MFT的检测工作中偶尔会出现耐热 ～ 24h，如所有管均不产气 ，可报告为阴性。如有产 大肠菌群数 总大肠菌数的不合理情况，这个问题虽 酸产气者，转种在 EMB上，置44．5℃培养箱内培养 然鲜见报导，但 已困扰检验和公卫人员多年。经过多 18h一24h，凡平板有典型菌落者 ，则证实为耐热大肠 年的工作实践研究，找出了出现这种情况的原因，并 菌群。 通过对检测程序的改 良，有效地杜绝了这种情况的发 1．2．2 改 良法 耐热大肠菌群检验步骤 ：取 1．2．1 生。 (3)用作验证总大肠菌群相同的菌落同时接种另一支 1 对象与方法 乳糖蛋 白胨培养液，置44．5℃水浴箱中，培养 (24± 2)h，如所有管均不产气，可报告为阴性。如有产酸 1．1 对象 以2013年钦北区农村供水工程监测点 产气者，则证实为大肠菌群。 为研究对象，在丰水期和枯水期采集水样进行检测。 1．3 统计学处理 用SPSS11．5统计软件进行统计 共采集水样80份，出厂水和末梢水各40份。 学分析，采用配对t检验和相关性分析。 1．2 方法 检测方法按照 《生活饮用水标准检验方 法》(GB／T5750—2006)进行 。 2 结 果 1．2．1 总大肠菌群和耐热大肠菌群多管发酵法常规 80份水样原法和改 良法均同时检出总大肠菌群 检测方法(简称原法) (1)初发酵试验：取 1Oml水