丹莲肝康颗粒中药材的提取工艺研究.docVIP

丹莲肝康颗粒中药材的提取工艺研究 　　摘 要：目的：对丹莲肝康颗粒中药材的提取工艺进行研究。方法：将干膏得率和丹参酮ⅡA提取率作为指标，使用均匀设计法来选择紫草醇和丹参提取工艺中的乙醇用量、乙醇的体积分数、提取的时间、浸泡时间和提取次数；将丹酚酸B和野黄岑苷的干膏得率和提取率当做指标，使用正交设计试验的方法来对整个工艺中的提取时间、浸泡时间、加水量等几个方面进行优化，从而对于最优的提取工艺进行验证。结果：最佳的提取工艺是紫草和丹参加入9.6倍的乙醇，乙醇的比例是95%，在经过了3个小时的浸泡之后，提取两次，每一次是20min，在经过了3次的验证试验之后，试验结果显示丹参酮ⅡA的提取率平均值是44.73%，而干膏得率的平均值是25.55%。将药渣和其余的一些药材也提取3次，在第一次的时候要加入12倍的水，在第2次和第3次的时候要加入10倍的水，而且每一次提取的时间是1h，在这三次验证中，野黄岑苷的平均提取率是71.67%，而丹酚酸B的平均提取率是47.67%，干膏得率的平均值是24.63%。结论：提取工业是可行的，为丹莲肝康颗粒的制备提供了科学的依据。 　　关键词：丹莲肝康颗粒；药材提取；丹参酮ⅡA；丹酚酸 　　丹莲肝康颗粒在经过一系列的临床试验得到的药物，这种药物主要是由丹参、半枝莲、鳖甲、赤芍和莪术等成分组成的，有着软坚散结、活血化瘀和清热利湿的作用，主要是用来治疗腰腿酸软、头晕耳鸣、胁下痞块、五心烦热等症状，在临床中在主要是用于肝肾阴虚型上的慢性肝炎和肝硬化。为了选择最佳的药材提取工艺，使用均匀设计法、正交试验法来进行工艺的优化。本文就是对丹莲肝康颗粒的实际应用进行详细的研究，为相关的研究提供借鉴。 　　1 材料 　　1.1 仪器 　　JJ300型电子天平、XS204电子分析天平、1200高效液相色谱仪和DHG型电热恒温鼓风干燥箱。 　　1.2 药品、药材和试剂 　　半枝莲、丹参、鳖甲、紫草、莪术、野黄岑苷对照品、丹参酮ⅡA对照品、丹酚酸B对照品。其中丹参酮ⅡA对照品是供含量测定使用的，丹参中含有0.42%的丹参酮ⅡA，野黄岑苷对照品的纯度是92.1%，半枝莲中含有0.24%的野黄岑苷，丹酚酸B对照品的纯度为92.1%，丹参中含有3.93%的丹酚酸B，甲醇、乙腈是色谱纯，使用的水是双蒸水，其他的试剂是分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 含量测定 　　2.1.1 干膏得率的测定。要精密的吸取丹莲肝康的浓缩液，浓缩液的含量是20mL，将其放在已经干燥到恒质量的蒸发皿中，在这一状态下进行水浴蒸干，并且根据干燥失重测定法来进行相应的测定，对于干膏得率进行计算。 　　2.1.2 丹参酮ⅡA的测定。（1）对照品溶液在配制的过程中，要精密的进行丹参酮ⅡA对照品的称取，将其放在棕色的量瓶中，之后就可以向立面加入甲醇进行稀释，将其稀释成为1ml的溶液中含有40.2μg的丹参酮ⅡA丹参酮ⅡA溶液。（2）供试品溶液在配制的过程中，要精密的吸取丹莲肝康的浓缩液，吸取1ml，将溶液放置在50ml的量瓶中，之后就可以向里面加入45ml的甲醇，并且进行超声处理，在超声处理的过程中，功率是100w，超声频率是50kHz，超声处理的时间是15min，将其放冷加入乙醇到相应的刻度，进行摇匀和过滤处理。（3）色谱柱使用的是：EclipseXDB-C18，检测的波长是270nm，流速是1ml/min，流动相是甲醇-水，比例是80：20，进样量是10μl，柱温是25ml，y代表的是峰面积，x代表的是质量不浓度，从而达到相应的方程如下：y=25.278x+1.76，其中r为0.999，n为5，相关的结果表明了丹参酮ⅡA在质量浓度为6.4-32μg/ml这一范围内和峰面积是呈现良好的线性关系的。精密度试验RSD是0.73%的时候，根据这一结果就可以知道精密度是良好的，而供试品溶液在8h内是呈现稳定的状态的，这时RSD是0.26%，在平均加样回收率是98.23%的情况下，RSD是1.55%。根据色谱专属性试验的结果可以得知，丹参的阴性对照供试品色谱在保留的时间上是无色谱峰，也就是说明了阴性对照是无干扰的。 　　2.1.3 丹酚酸B的含量测定。（1）对照品溶液在配制的过程中，要精密的称取对照品适量，向里面加入甲醇，从而制成1ml中就含有282.5μg丹酚酸B的对照品溶液。（2）供试品溶液的配置。供试品溶液在配置的过程中，要精密的量取5mL的丹莲肝康的浓缩液，将其放在50mL的量瓶中，之后加入甲醇40ml，?M行超声处理30min之后取出，放冷加入甲醇到相应的刻度，摇匀过滤。（3）色谱柱：EclipseXDB-C18，流动相：[甲醇-乙腈（3∶1，V/V）]-1%甲酸水溶液（38∶62，V/V），流速：1ml/min；检测波长：286nm；柱