胶原的抗原性和免疫原性(2011-7-4)【ppt】.ppt

胶原的抗原性和免疫原性 2011-7-4 影响免疫原性的因素 人类对牛胶原的免疫原性 市售胶原制品的免疫原性与副反应 其他胶原的免疫原性 影响免疫原性的因素 胶原的结构 供体/受体种属特性 提取方式（酶、酸） 纯度 植入部位 交联方法（戊二醛） 其他 两个重要概念 抗原性 特指胶原与分泌型抗体的结合和作用能力 与自身耐受和种间差异密切相关 免疫原性 能够刺激机体产生免疫应答反应的能力 它指的是一个包括形成（和作用于）上述特异性抗体的过程。 “抗原决定簇” 抗原决定簇 位于抗原分子上（表面或内部） 与抗体相互识别和结合的位点（一个表面或空间结构） 引起强烈或微弱的免疫应答，或根本不产生免疫应答反应 胶原氨基酸序列的同源性问题 三螺旋结构 种属同源性很高 与哺乳动物相比，氨基酸序列的同源性高达？ 端肽 大多数学者认为主要抗原决定簇位于端肽区域 部分研究认为除了端肽外，主要抗原位点是位于中央区或三螺旋区的 影响因素2——供体/受体的种属类别 影响因素3——提取方法 酸溶性胶原，端肽结构不完整 胃蛋白酶溶解的胶原，属于端肽缺陷型胶原 酸溶法和酶溶解法制备的胶原，二者在免疫反应这一块有何差异？目前并不清楚 Questions：端肽的去除对于临床判断免疫学反应到底有何价值和意义？ 胶原中的酸溶部分与中性盐溶部分似乎存在共同的抗原决定簇 胶原中的不溶性部分，具有免疫原性，但不会产生一些能与可溶性胶原具有交叉反应性的抗体（？） 补充 胶原蛋白酶对胶原蛋白的水解主要破坏胶原的螺旋区，使其变成小分子肽链 胃蛋白酶对胶原蛋白的酶解促溶, 只是切除胶原蛋白的尾肽,使其变为可溶 酶提取和酸提取的胶原在性质上无显著不同 端肽的作用 参与胶原的交联、纤维形成过程 切除端肽 导致胶原三螺旋结构不完整 溶解性增加 胶原发生不定向重排 失去带状纤维排列方式 影响因素4——纯度 非胶原成分是导致胶原止血材料引起免疫反应的最主要因素 影响因素5——植入位点 材料的植入位点与其免疫反应也有一定的关联性 与血液循环系统或淋巴系统距离越远，发生免疫反应的几率越小 植入部位可能使材料暴露于免疫系统中，因而被排斥，反之，则呈现“免疫沉默现象”。 影响因素6——交联处理 戊二醛交联能够有效降低免疫原性，因交联作用重塑或修饰了胶原的主要抗原性位点，减少了其与抗体的结合能力 戊二醛交联导致免疫反应增强，是戊二醛本身的细胞毒性引起？还是戊二醛导致了抗原性位点的暴露？ 人类对牛胶原的免疫原性 仅一篇文献提出：对胃蛋白酶处理的牛胶原，其三螺旋区和中央区的抗原决定簇是引起人类免疫应答反应的主要抗原位点（与人体抗血清反应） 目前尚没有证据表明，人类对牛胶原和猪胶原发生免疫反应的的主要抗原性位点是位于端肽内部的。 市售胶原制品免疫原性及副作用 牛胶原注射剂临床副反应 超敏反应——最常见的副反应 皮试人群3%(偶有高达10%，因产品而异）在注射部位发生（最初72h内） 治疗患者中1-2%（偶有高达5%，因产品而异）在注射部位出现 随时间延长，被宿主机体吸收，副作用消失 在发生超敏反应的人群中，约有90-100%人群血清中证实存在牛胶原抗体 这些抗体特异于牛I型胶原，而不会与人类的Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型胶原存在交叉反应。 一过性的非炎症反应——24-48h内消失 短时肿胀 轻微发红 略感不适 注射区轻度水肿或瘙痒 肉芽肿（发生率1/万） 急性水疱 亚急性溃疡 其他胶原的免疫原性 大鼠胶原（可溶性） 兔抗大鼠胶原在大鼠中的组织定位研究发现，抗体会定位于肾小球基底膜或肾小管上及多数器官结缔组织部位。 抗体是针对胶原的，还是针对非胶原的蛋白或多糖？ 人与大鼠I型胶原a1肽链的同源性， Identities = 1348/1464 (92%) 人与大鼠I型胶原a2肽链的同源性， Identities = 1348/1464 (92%) 其他胶原研究较少 如何评价胶原材料的免疫原性和毒性？ 阴性皮肤试验不代表以后的皮肤试验也是阴性的（？） * * * * 影响因素1——胶原的结构 胶原的抗原决定簇被分为三大类： 螺旋区[图1（a）]——被抗体三维构象所识别（如一个完整的三螺旋结构） 中央区[图1（b）]——定位于原胶原的三螺旋结构内，但与抗体的识别主要依赖于氨基酸序列，而不是三维空间构象 末端区[图1（c）]——定位于胶原分子的非螺旋结构的末端区域（末端肽） Furthmayr F,Stoltz M,Becker U,Beil W,Timpl R.Chicken antibodies to soluble rat collagen.II.Specificityof the reactions with individual polypeptide