烟草根瘤化对其细胞质膜Ca2+ATPase活性的影响.pdfVIP

I.617691 烟草根瘤化对其细胞质膜Cap{-ATP.“活性的影响 专业:细 胞 生 物 学 研究生:庄 国庆 指导教师:韩善 华 我们以只在共生体系中才固氮的根瘤菌一夏豆根瘤菌sit快生型突变株 和美国烟草K326组建成共生固氮体系，使用2,4-D诱导结瘤。我们对美 国烟草K326产生的再生苗进行了4种处理(CB:常规Jensen无氮培养液处 理;D:使用含2,4-D(0.3mg/L)的Jensen无氮培养液处理;R:使用含 根瘤菌(5x248个L/)的Jensen无氮培养液处理;R+D:使用含2,4-D(0.3mg/L) 和根瘤菌 (5x148个几)的Jens。无氮培养液处理)。 在实验中，我们测定了不同烟草组织来源的细胞质膜Ca-ATPase的活 性，比较了不同测定条件对烟草叶和根细胞质膜Cao-ATP,活性的影响，并 且还测定了2,4-D,根瘤菌以及二者共同处理对烟草细胞质膜Cap`-ATP.. 的活性的影响。另外还对不同处理烟草的生长从外观形态和组织鲜重两方面 进行了比较。 使用不同测定条件测定烟草根和叶细胞质膜Cap-ATP结果表明，二者 在许多方面都不尽相同。前者的最适州为6.0，后者则为7.0,而且后者在 一个相对较宽的州范围内有高的活性。叶细胞质膜Ca!-ATP.的最适反应 温度为45℃，(ATPh.。为2.2mmol/L，根细胞质膜Ca-ATP-则分别为40℃ 和1.9mmol/L。叶和根的细胞质膜Ca-ATP,均受Cap激活。曙红B(EB) 对烟草叶和根细胞质膜Cap-ATPase有明显的抑制作用，当EB浓度达到50 Nmol/L后，抑制作用才不再有显著的增加。本文讨论了烟草叶和根细胞质 膜Cap-ATP-特性出现差异的原因及其与环境的关系。 研究发现仅用根瘤菌处理的实验组烟草生长最好，根系发达，没有类根 瘤产生。它的茎和叶的鲜重均比CK组要高。仅用2,4-D处理后的烟草无论 是外观还是鲜重量上都表现出生长受到一定程度的抑制，2,4-D处理一周 后，即能在烟草根部开始产生瘤状结构，须根减少，根尖膨大，整个根系也 缩短变粗，且几乎没有根毛表面光滑。植株个体、叶片也比其它处理矮小， 且烟叶明显变黄，表明2,4-D处理对烟草生长不利。使用2,4-D和根瘤菌 同时处理的烟草在长势上要好于仅用2,4-D处理而接近CK，处理7天左右， 根上开始产生乳白色半透明状点状突起，25天左右，其根部形成清晰可辨 的类根瘤。另外，我们还测定比较了不同发育时期根瘤化处理的烟草的根， 叶和茎细胞质膜Cap`-AT踪的活性，结果发现在处理早期 (1-3周)2,4-D 能引起烟草的根、茎和叶质膜Cap-ATPase活性大大增强，表明外界激素刺 激信号能引起细胞胞质内部Cap浓度的变化，启动Cap唁号，传递外界刺激 信息，引起细胞内部发生一系列的生理生化变化，最终可能导致在形态上也 出现一定的变化- 产生瘤状物，为根瘤菌的侵入打好基础。 综上所述，我们认为通过植物激素-2,4-D打破根瘤菌侵染非豆科植物 的障碍是可行的，其过程可能涉及细胞Cap信号传递，而Ca-ATP-在这一 过程中发挥有重要作用。 关键词:烟草;类根瘤;2,4-D;细胞质膜;Cap-ATP,;测定条件;根瘤菌 The Effect of Nodulation on the Plasma MembraneCa-ATPasefromTobaccoCell Major:CellBiology Name:Zhuangguoging Tutor:Ran shanhua TheregeneratedtobaccoK326plantletsweredisposedinfour differentcultureconditions:(R+D)0.3mg/L2,4-Dand5X10/L rhizobium;(R)5X108/Lrhizobium;(D)0.3mg/L2,4-D;(CK)native JesenNon-nitrogenmedium. Tobacco treatedwithrhizobiumalonegrewmostwellamongthe fourtestedgroups.Tobaccoonlytreatedwith2,4-Dappearedtobe hurted.Ithadthechar