金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药的实验研究.pdfVIP

摘要 目的：了解金葡菌对万古霉素的耐药现状；体外诱导万古霉素耐 药金葡菌；分析金葡菌凝固酶活性及其他生物学性状改变与万古霉素 耐药的关系。 方法：1．调查金葡菌对万古霉素的耐药情况。对132株临床分离 的金葡菌分别进行2肛g／ml、4pg／ml万古霉素脑心浸液琼脂生长试 验，并用菌群分析法筛选对万古霉素异质性耐药金葡菌。4肛g／ml万 古霉素生长试验阳性菌株用AP—PCR进行基因分型。2．体外诱导万古 霉素耐药金葡菌。在体外用万古霉素对15株金葡菌进行诱导：诱导 过程中每隔5代进行菌种鉴定；诱导出耐药金葡菌后，分析耐药菌株 其他抗生素敏感性改变情况。3．分析耐药诱导过程中金葡菌凝固酶活 性及其他生物学性状改变情况。诱导过程中每隔5代测定金葡菌凝固 酶活性；检测诱导过程中金葡菌coa基因DNA相对含量有无改变；利 用SSCP和基因测序技术分析诱导前后金葡菌coa基因和spa基因序 列改变情况。 结果：1．金葡菌万古霉素耐药情况调查结果：62株(47．O％)金 葡菌能在含2pg／ml万古霉素的脑心浸液琼脂上生长，9株(6．8％) 金葡菌能在含4¨g／ml万古霉素的脑心浸液琼脂上生长，但其MIC皆 ≤2“g／ml。有1株金葡菌对万古霉素异质性耐药。9株菌株都能产生 稳定的AP-PCR谱型。2．体外诱导万古霉素耐药金葡菌结果：诱导出 3株对万古霉素中介耐药金葡菌；3株万古霉素中介耐药金葡菌对其 他抗生素耐药性也增加。3．耐药诱导过程中金葡菌凝固酶活性及其他 生物学性状改变情况：有6株(包括3株对万古霉素中介耐药)金葡 菌凝固酶活性降低。A18耐药株C08基因DNA相对含量下降，A56、 A59的coa基因和spa基因都检测到序列改变。 结论：1．未发现临床株中对万古霉素完全耐药或中介耐药的金葡 菌，异质性耐药金葡菌分离率为0．75％；在本地区尚无对万古霉素敏 感性降低的同源株的流行趋势。2．体外很难诱导万古霉素完全耐药金 葡菌；与万古霉素共孵育后金葡菌对其他抗生素敏感性也发生改变。 3。金葡菌凝固酶活性下降、C0,8．基因DNA相对含量降低、C08．基因和 spa基因序列改变与万古霉素耐药可能有一定关系。 关键词金黄色葡萄球菌，万古霉素，耐药性 lI ABSTRACT of aimofthis istodeterminethesituation objective：The study in induce resistance aureus@aureus)tovancomycin，to Staphylococcus the of invitroandtoobserve S．aureus changes vancomycin-resistantant andtheir andothercharacteristicsofS．aureus activity coagulase witll resistance． relationshipvancomycin Methods：1．we the ofresistancein＆aureus investigatedprevalence werestudied