天然药物化学试验-王世范.PPT

槐花米中芦丁的提取分离 实验目的 通过芦丁的提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理与操作。 了解苷类结构研究的一般程序和方法 了解UV在黄酮类化合物结构鉴定中的应用 实验原理 芦丁溶于热水，难溶于冷水，且分子具较多酚羟基，显弱酸性，在碱液中易溶，在酸中易析出沉淀，故可采用碱提酸沉法提取芦丁。 实验方法 思考题 苷类结构的鉴定大体程序如何？ 怎样确定芦丁结构中糖基是否联结在槲皮素3-O-上？ 怎样证明芦丁分子中只含有一个葡萄糖及一个鼠李糖？ 大黄中蒽醌类成分的提取分离 实验目的 1．掌握PH梯度萃取的原理及操作技术； 2．掌握蒽醌类化合物鉴定方法； 3.了解液液萃取法分离混合物的实验方法； 实验原理 利用乙醇为提取溶剂，可把不同类型性质互异的蒽醌类成分提取出来； 总蒽醌苷元在乙醚中有一定的溶解度，故回收乙醇后得总提取物可用乙醚提取总苷元； 根据蒽醌衍生物的酸性强弱，用不同的碱液进行萃取，最后得到不同的蒽醌苷元。 实验方法 思考题 PH梯度萃取的原理是什么？ 大黄中各蒽醌化合物的酸性及极性强弱顺序如何？ 根据大黄中所含五种羟基蒽醌的结构，说明为什么它们可以分别被不同强度的碱性水溶液提取出来？ * * 天然药物化学实验须知 （一）实验要求 （二）实验室规则 （三）实验室安全注意事项 （四）实验报告格式 实验一 药用植物化学成分的提取 一 实验目的 1 了解天然药物成分的分析方法 2 掌握预实验的实验技术 二 实验原理： 1 单项预试法：寻找特定成分。 2 系统预试法：在未知情况下对可能含有的各类成分进行全面检查。 三 实验步骤： 1 制备样品试液 （1）石油醚提取液 —— 挥发油、油脂、甾醇三萜 （2）乙醇提取液 —— 黄酮内酯、生物碱、酚类香 醇、萜类内酯、强心苷、鞣质、有机酸 （3）水提取液 —— 氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、皂苷有机酸 2 选择合适的展开系统 3 薄层层析 取长春花粉末20g,加70%乙醇150ml加热回流0.5h,抽滤，滤液减压浓缩至浸膏。 展开系统： 氯仿：甲醇=10：1 实验 二 薄层层析及中药成分预实验 一 实验目的： 1 了解薄层层析的原理及应用。 2 掌握薄层层析的实验技术。 二 实验原理 薄层色谱即TLC，属固液吸附色谱，利用吸附剂（硅胶）对不同组分吸附能力的差异，从而达到分离目的的方法。 三 TLC的应用 1 可用于判断两个化合物是否相同。 2 可用于确定混合物中含有的组分数。 3 可用于为柱色谱选择合适的展开剂。 4 可跟踪有机反应。 实验步骤 1 点样：画出起点线，即距离薄层板一端约1cm处。 2 展开：浸入深度0.5cm,待展开剂前沿离顶端1cm处，取出用铅笔画出展开剂前沿。 展开剂：氯仿：石油醚=5：1 显色：（1） 紫外灯；（2）碘缸；（3）5% 硫酸乙醇溶液 4 计算比移值 Rf = 原点距斑点中心距离/原点距展开剂前沿距离 思考题： 1、在混合物的薄层色谱中，如何判定各组分在薄层上的位置？ 2、展开剂的的高度若超过了点样线对实验结果有何影响？ 3、对一个未知混合物如何选择展开剂？ 实验三 硅胶柱层析 一 实验目的 1、 了解硅胶柱层析的原理。 2 、掌握硅胶柱层析的技术。 二 实验原理 硅胶柱层析属吸附色谱，是利用吸附剂硅胶对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂洗脱，以使组分分离。 三 实验步骤 1 装柱 湿法：量取一定量体积的洗脱剂（V0），倒入色谱柱中，然后，将硅胶放置于烧杯中，加入一定量的洗脱剂搅拌至无气泡，加入柱内，并将活塞打开，一边沉降一边加，直到加完硅胶，仍使洗脱剂流滴一段时间，使色谱柱中高于硅胶的溶剂几乎全部留入接收瓶中，正确计量接收器中的溶剂量（V1），计算色谱柱的保留体积（V0-V1） 2 上样 干法： 称取一定量硅胶（色谱柱中硅胶量的10%），置于蒸发皿中，用滴管慢慢加入样品溶液，用滴管慢慢加入样品溶液，边加边搅拌，待硅胶已完全被样品溶液湿润时，在水浴锅上蒸除溶剂，蒸除溶剂后的吸附有样品的硅胶在1000C加热除去水分， 3 洗脱 样品加完后打开活塞放出液体至柱面相同时，加入洗脱剂至液面高出柱面约10cm,在柱面上加入一个小滤纸片，再加2cm厚的硅胶，再加一团脱脂棉。 洗脱剂：石油醚：乙酸乙脂：=3：1 洗脱收集：每份洗脱液按30ml收集 显色合并： 1、芦丁的提取、精制 槐米粗粉（40g） 置1000ml烧杯中，加水600ml，搅拌下加入石灰乳，调pH8—9，加热至微沸，保持30分钟，趁热抽滤。 残渣 滤液 在60—70℃下用浓