南农生魏惋技术制药RNAi.pptVIP

C/EBPs是生物体内重要的转录因子， 迄今已报道的C/EBPs有6 类，其中，人类的C/EBPβ 又称NF-IL6，是C/EBPs家族中的一个重要成员。研究发现， NF-IL6 经常在某些肿瘤细胞系如乳腺癌、皮肤癌等中过表达，因此，降低NF-IL6 的表达水平，可能成为肿瘤治疗的重要途径。采用特异设计的针对NF-IL6 mRNA的siRNA，与能特异表达siRNA片段的质粒进行重组后感染人乳腺癌瘤细胞MCF-7，以研究RNAi 技术能否特异性抑制MCF-7( 中转录因子NF-IL6基因的过表达，从而为肿瘤的基因治疗提供新的方法和实验基础 * 四、RNA干扰的研究方法 siRNA的制备 5种siRNA制备方法的比较 四、RNA干扰的研究方法 siRNA的制备 5种siRNA制备方法的比较 反义核酸设计与修饰技术 选择靶序列，提高制剂的稳定性，细胞捕获率 （一） 反义核酸靶位序列设计 空间结构影响互补核酸接近 1、反义寡核苷酸文库（随机法） 利用基因文库目的基因序列，合成一系列寡核苷酸（50-100个） ，针对mRNA不同区域，检验诱导反义作用的能力。 费时费力 四、RNA干扰的研究方法 2、计算机模拟预测易感靶位 易感性受空间结构尤其是折叠的影响 计算机模拟RNA(目的基因)二级结构→开放环，膨出部分易于杂交