桔梗的旌皖痰镇咳实验.pptVIP

桔梗的镇咳化痰实验 中药二班第一组 桔梗(Platycodon grandiforus)，桔梗科桔梗属植物，多年生草本，叶子卵形或卵状披针形，花暗蓝色或暗紫白色，可作观赏花卉。其药用部位为桔梗的干燥根部，味苦、辛，性微温，入肺经，能祛痰止咳，并有宣肺、排脓作用。其嫩茎叶和根均可供蔬食。盛产于我国东北部地区，是朝鲜族的特色菜。 【实验目的】 学习小鼠氨水引咳法，观察桔梗水煎液的止咳作用； 学习酚红从呼吸道排泌的实验方法，观察桔梗水煎液对小鼠气管段酚红排泌量的影响 【实验原理】 化学刺激物可作用于呼吸道感受器，反射性地引起咳嗽。故，凡能抑制咳嗽中枢或降低呼吸道感受器敏感性的药物均有止咳作用。 于小鼠腹腔注射酚红后，后者可以部分地从气管分泌排出。将气管段放入定量的生理盐水中，加入NaHCO3使其显色。用紫外分光光度计测出酚红的排泌量，从而得知药物的化痰作用。 桔梗所含的皂苷经口服刺激咽喉黏膜和胃黏膜，反射性地增加支气管粘膜分泌，使痰液稀释而易被排出。桔梗及桔梗皂苷亦有镇咳作用 【实验步骤】 一、 止咳药实验 【实验准备】 实验动物：小白鼠，禁食不禁水12h，雌雄各半，体重18~22g 实验器材：500mL烧杯，表面皿（直径小于烧杯），筛网 实验药品：浓氨水，桔梗水煎液（1g/mL），苦味酸，生理盐水 【实验方法】 筛选小鼠：将小鼠置于500mL烧杯中，在直径小于烧杯的表面皿内放一棉球，上面加盖筛网，向棉球中注入0.4mL浓氨水，迅速将烧杯倒置，使得氨水刺激小鼠引发咳嗽（腹肌收缩，同时张大嘴，有时有咳声）。以1min内咳嗽次数≥3次判定为咳嗽模型初步筛选成功。用于接下来的实验。 将筛选出的小鼠标记称重，随机分为两组。甲组灌服桔梗水煎液20mL/kg（0.2mL/10g），乙组灌服等体积生理盐水。 给药30min后，氨水刺激小鼠咳嗽，以倒置烧杯发生咳嗽的时间为咳嗽潜伏期，3min内不咳嗽者，记为3min，记录小鼠3min内咳嗽次数。进行统计学检验 【结果处理】 二、祛痰实验 【实验准备】 实验动物：小白鼠，禁食不禁水12h，雌雄各半，体重18~22g 实验器材：手术剪，镊子，注射器，灌胃针头，小试管，试管架，蛙板，721型或723型分光光度计，离心机 实验药品：桔梗水煎液（1g/mL），生理盐水，苦味酸，5%NaHCO3，0.5%酚红溶液 【实验方法】 取12只小鼠，标记，称重，随机分为两组 甲组灌服桔梗水煎液20mL/kg（0.2mL/10g），乙组灌服等体积生理盐水。 给药30min后，由腹腔注射酚红溶液（0.5mL/只），30min后颈椎脱臼处死。剥去气管周围组织，剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管，放进盛有3ml生理盐水的试管中，再加入5%NaHCO3溶液，离心后取上清液，用分光光度计（波长546nm）测定OD值，计算祛痰指数，进行统计学检验。 【数据处理】 桔梗水煎液的祛痰实验研究 【注意事项】 给药至处死动物的时间必须准确。 解剖和除去周围组织时动作要轻柔，以免损伤血管。 解剖时，须将气管周围组织去除干净，气管段周围如果粘附有血液应立即用滤纸吸净。 * 桔梗皂甙有很强的溶血作用，其溶血指数与其来源产地和生长年限、采集时间、加工方法等因素相关，从1：100 到1 ：1000 不等。韧皮部的溶血作用为本质部的4.4-6.5倍，不去皮的桔梗溶血作用略大于去皮桔梗。因此桔梗不可注射给药。小鼠皮下注射的最小致死量为770mg/kg。粗桔梗皂甙灌胃小鼠和大鼠的半数致死量分别为420mg/kg和800mg/kg，皮下注射分别为22.3mg/kg和14.1mg/kg。灌胃大剂量桔梗皂甙，可反射性兴奋呕吐中枢，可引起恶心、呕吐。 桔梗 桔梗水煎液镇咳实验研究 组别 动物数量（只） 剂量（g/kg） 咳嗽潜伏期（s） 咳嗽次数（次） 生理盐水组 桔梗水煎液组 组别 动物数量（只） 剂量（g/kg） 气管酚红排泌量（μg/mL） 生理盐水组 桔梗水煎液组 *