chap凝集素与.ppt

第七章 凝集素 Questions 什么是凝集素？ 凝集素和配体相互作用力的本质？ 凝集素的分类。 举例说明植物凝集素在研究糖链结构和医学诊断上的应用？ ConA、LCA、WGA、DSA各自结合糖链的特点？ BEA类毒素的结构组成？各组成部分的生物功能？ 原发性肝癌的早期诊断 甲种胎儿球蛋白（AFP） 浓度升高是肝癌诊断的重要因素 原发性肝癌患者血清中的AFP会出现： 核心Fuc 血清Tf和肝型ALP: 天线数增加，核心Fuc增加 小部分原发性肝癌患者血清AFP阴性，则可检测Tf和肝型ALP的N-糖链结构异常。 可以分别用什么凝集素检测？ 动物凝集素 动物凝集素的发现 动物凝集素的分类 各类动物凝集素的结构和功能 动物凝集素的发现历史 海绵试验(1906~1907)——第一次发现糖参与了动物细胞之间的相互作用。 肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体(Asialoglycoprotein Receptor，ASGPR)的发现 20世纪70年代，发现巨噬细胞甘露糖受体 80年代末，预测蛋白质的糖识别域取得进展 Reaggregation of sponge 动物凝集素的分类 C-type：包括selectin、collectin等，活性依赖Ca2+ Galectin： 早期也称S-type P-type：M-6-P受体 I-type：免疫球蛋白超家族成员，与Sia(Siglec)或其他糖结合 正五聚蛋白类(Pentraxin) 钙连蛋白(calnexin)和钙网蛋白(calcireticulin) 。。。。。。 C-type lectin Ca2+依赖的凝集素大家族。CDR具有一级结构同源性。 发现历史：肝细胞表面的去唾液酸糖蛋白受体——肝凝集素 肝凝集素的发现 对象：血浆铜蓝蛋白 证据： 1）大多数血清糖蛋白都具有sia末端 2）酶法使放射性标记的血浆铜蓝蛋白去唾液酸化，再注射到兔子血液中。发现其迅速被清除。 3）如果末端暴露的Gal结构改变，可延长其在血清中的半衰期。 4）利用唾液酸转移酶和CMP-NeuAC处理，可以使蛋白再次唾液酸化，这样的产物半衰期可恢复。 5）被清除的放射性去唾液酸糖蛋白被发现结合在肝脏，分离出受体。 去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR) 去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)仅存在于哺乳动物肝细胞膜表面，能特异性识别和结合末端为β-Gal或GalNAc残基的糖蛋白，其数量的变化可反映肝脏生理及病理状况。 生理功能：控制唾液酸化糖蛋白的半衰期。 结构：含单个C-type CRD亚基的三聚体。 可用于基因靶向转移和药物靶向治疗。 C-type lectin亚家族 跨膜的C-lectin I型跨膜蛋白：N-端在胞外 Selectin（选择素、选凝素）：L-、E-、P- 巨噬细胞甘露糖受体（多CRD） II型：N-端在胞质中，C-端在胞外。如肝凝集素、淋巴细胞凝集素 可溶性C-lectin Collectin（胶原凝素） Lectican（凝集蛋白聚糖）：一些蛋白聚糖（versican、aggrecan、neurocan、brevican等）的核心肽 无脊椎动物凝集素 蛇毒 …… C-type lectins亚家族结构模式图 选凝素 (Selectin) 三种选择素介导炎症反应中白细胞与血管内皮细胞的粘附 L-、E-、P-选择素的比较 L-selectin 介导淋巴细胞(lymphocyte)的归巢 P-selectin出现于炎症反应中内皮细胞募集嗜中性白细胞过程的早期 E-selectin出现于炎症反应中内皮细胞募集嗜中性白细胞过程的后期 sLex结构 淋巴细胞归巢 淋巴细胞归巢 (lymphocyte homing)是淋巴细胞的定向游动,包括： 成熟淋巴细胞向外周淋巴器官归巢 淋巴细胞再循环，即来自血液的淋巴细胞通过毛细血管后静脉（高内皮小静脉，HEV）进入淋巴循环，以利于免疫细胞接触外来抗原，然后再回到血液循环 淋巴细胞向炎症部位(如皮肤,肠道粘膜和关节滑膜等炎症部位)迁移 其分子基础是淋巴细胞表面称之为淋巴细胞归巢受体(lymphocyte homing recepter, LHR)与内皮细胞上相应的血管地址素(vascular addressin)的相互作用。 三种选凝素的结构 选择素的配体 (Selectin ligands) 巨噬细胞甘露糖受体 (Mannose receptor, MR) 分布：肝脏内皮细胞和巨噬细胞 功能：清除溶酶体酶，tPA和髓过氧化物酶等炎症反应分泌出的高甘露糖型糖蛋白 结构：具有多个C-type CRD 促黄体素与促滤泡素在体内的不同命运 促黄体素糖链末端为4-O-硫酸化GalNAc，可被MR识别和迅速清除； 促滤泡素糖链为二天线复杂型，末端为Gal和Sia，半衰期较长。 胶原凝素（