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第十章 血清无机离子及微量元素测定 第一节 钾、钠离子测定 钠离子(Sodium ion, Na+)是细胞外液中的主要阳离子，含量最多，平均浓度为140mmol/L，其次为钾离子（potassium ion，K+）平均浓度为4.5mmol/L。由于钠、钾离子对机体有重要的生理作用，血清(浆)中钠、钾浓度的改变与某些疾病有密切的关系，故临床上非常重视血清钾、钠浓度的测定，且多数情况下是同时被测定。体液中钠、钾测定的常用方法有化学法、火焰发射光谱法、离子选择电极法及原子吸收分光光度法。化学法因操作步骤繁琐，测定结果的准确性及精密性差而被淘汰。我国卫生部临床检验中心推荐火焰发射光谱法(flame emission spectrophotometry，FES)和离子选择电极电位分析测定法(ionselective electrodes，IES)为钠、钾测定方法，其中FES法为参考方法。近来发展的酶法测定钠、钾具有特异性强、与火焰发射光谱法高度相关等优点，日益受到临床化学家的重视。血清钾、钠的原子吸收光谱法测定灵敏、准确，但设备昂贵，需要特殊的元素灯，因此不能广泛使用。本节主要介绍火焰发射光谱法和离子选择性电极法。 实验55 火焰发射光谱法测定血清钾、钠离子 【原理】 火焰发射光谱法(FES)是一种原子发射光谱分析技术，利用火焰的热能使原子被激发而发射出特异的光谱进行分析。丙烷-空气火焰的温度使血清或尿液中的K+、Na+气化。这些气化的离子从还原焰中获得电子生成基态原子Na0、K0。基态原子在火焰中被加热，结果生成激发态原子Na*和K*。激发态的原子不稳定，能迅速回到基态，放出能量，发射出元素特有波长的辐射谱线，钠的特征谱线为589nm(黄色)；钾的特征谱线为767nm(深红色)，用相应波长的滤光片将谱线分离，然后通过光电管或光电池转换成电信号，经放大器放大后进行测量。样品溶液中钠、钾浓度越大，所发射的光谱越强，发射光谱强度直接与钠钾浓度成正比。用已知含量的标准液与待测标本对比，即可计算出血清、尿等标本中钠钾的浓度。内标法用含锂的溶液作稀释液，同时测定锂的电信号(锂火焰呈红色，波长为671nm)，根据钠或钾电信号与锂电信号的比值作为定量参数进行钠、钾含量的计算，以减少由于雾化速度和火焰温度的波动所引起的测定误差，可提高测定的准确度和精密度，当前国产火焰光度计多属直接测定型，本实验介绍直接法。 【试剂与器材】 1．钾标准贮存液(10mmol/L) 精确称取经110～120℃烘烤4h以上并置于干燥器至恒重的氯化钾(AR或GR)0.7455g，用去离子水溶解，并定容至1 000ml。 2．钠标准贮存液(200mmol/L) 精确称取经110～120℃烘烤4h以上并置干燥器至恒重的氯化钠(AR或GR)11.691g，用去离子水溶解后定容至1 000ml。 3．钠钾标准应用液Ⅰ(钾0.04mmol/L，钠1.2mmol/L) 取钾标准贮存液4ml、钠标准贮存液6ml溶于去离子水中，并定容至1 000ml。贮存于塑料瓶中备用。 4．钠钾标准应用液Ⅱ(钾0.04mmol/L，钠1.4mmol/L) 取钾标准贮存液4ml、钠标准贮存液7ml溶于去离子水中，并定容至1 000ml，贮存于塑料瓶中备用。 5．钾钠标准应用液Ⅲ(钾0.04mmol/L，钠1.6mmol/L) 取钾标准贮存液4ml、钠标准贮存液8ml溶于去离子水中，并定容至1 000ml，贮存于塑料瓶中备用。 6．HG-3型火焰光度仪(国产)。 【操作步骤】 1．待测标本准备 取不溶血的血清0.1ml，加去离子水9.9ml稀释。24h尿液标本充分混合后，吸出尿液，用去离子水作适当稀释。稀释的血清或尿液标本置火焰光度计的样品吸入管吸入，进行测定。 2．仪器准备 不同型号的仪器操作步骤不完全一样，可按仪器说明书进行操作。不同厂家生产的仪器虽然型号不同，但主机(包括空气压缩机)基本上包括雾化燃烧部分、光学部分和光度测量部分。国产火焰光度仪主要有6400型和HG-3型，本节以国产HG-3型为例描述其工作流程： (1) 接通电源，开启空气压缩机开关，2～3min后调节压缩空气压力为0.4kg/cm2。 (2) 检查各管道有无漏气，调节气阀并核对气压。 (3) 选择钠或钾测定档 (4) 点火，要求火焰高度稳定，焰色纯净，以不显黄色为宜。 (5) 吸入去离子水冲洗管道1min，调节零点，至少稳定1min，即可进行测定。 3．测定 吸入钠钾标准应用液(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)，分别记录各标准液读数；吸入去离子水，待指针回到零点，再吸入待测标本，记录测定液读数。 4．关机 使用完毕后，应以去离子水喷雾冲洗管道1～2 min，然后依次关闭检流计、燃气及空气压缩机开关