植物细昂望培养.pptVIP

1、细胞可以不断增殖，形成高密度的细胞群体，适于大规模培养； 2、能够提供大量较为均匀的细胞，为研究细胞的生长、分化创造方法和条件。 三.细胞悬浮培养的方法 1、培养基对于用愈伤组织制备的悬浮细胞培养的培养基以原愈伤组织继代时的培养基除去琼脂为好。为了提高细胞的分散度，对于生长素和细胞分裂素的比例需要进行一些调节。 2、培养细胞的起始密度及细胞记数 （1）最低有效密度的概念 在悬浮细胞培养中，使悬浮培养细胞能够增殖的最少接种量称为最低有效密度或者临界的起始密度。 最低有效密度由于培养材料、原种培养条件，原种保存时间长短、培养基的成分不同而有差异，一般为104~105细胞/ml 2）细胞记数要保证细胞培养的最低有效密度，在细胞游离后要对分离的单细胞进行记数，可用血球记数板 讨论: A、滞后期的长短主要取决于在继代时原种培养细胞所处的生长期和转入细胞数量的多少。B、加入条件培养基可以缩短滞后期。 条件培养基：曾培养过一段时间组织或细胞的培养基。C、缩短两次继代时间间隔，则可使悬浮培养的细胞一直保持对数生长期。D、如果使处在静止期的细胞悬浮液保持时间太长，则会引起细胞的大量死亡和解体 操作注意事项：对悬浮培养细胞继代时，进液口的孔径要小，只能通过单细胞或小细胞团（2- 4细胞），使用吸管或注射器。继代前，培养容器静置短时间，大细胞团沉降，再吸上层悬