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7电泳检定法
生化科技學系 酵素純化與分析 7
外加電流電壓 Input current, voltage
7 電泳檢定法：
-
ANODE CATHODE
+ + -
7.1 電泳原理：
Friction Charge
7.1.1 蛋白質的泳動率： 分子量分子形狀 分子的等電點
Molecular weight , shape Isoelectric point
a. 泳動率：
帶電分子在電場中會被電流緩慢移動，是為泳動 ，其泳動程度的大小稱為泳動率
(mobility) 。泳動率與分子上電荷密度成正比，而與其分子的摩擦力成反比：
(所外加 電壓mV) ×(分子之 淨電荷密度)
泳動率 ～ ────────────────────
分子與介質間之 摩擦力
上述之摩擦力，決定於此分子之大小、形狀。分子量大者摩擦力大，泳動率小；而球
形分子摩擦力較小，泳動率大。
b. 蛋白質的帶電性：
蛋白質分子所帶的淨電荷，取決於環境pH 的高低 。若環境pH 高於其pI ，此蛋白質
帶淨負電，反之帶正電；若剛好等於pI ，則淨電荷為零 (正電數目等於負電) 。因此同
一分子在不同pH 環境下，可能帶有不同 淨電荷(圖7.1) 。
圖 Buffer pH
7.1 10
環
9
境
影 8
響 7
分
子 Isoelectric point, 6
pI
的 5
帶
4
電
性 3
質
+ 0 - -
Net Charge of a Protein
c. 蛋白質大多由負極向正極泳動：
在電泳系統中電子由負極流向正極，因此帶負電的分子會跑向正極，帶正電的分子往
負極跑，不帶電者則不易泳動。大部分電泳系統的pH 定在 8.3 ，因為大多數蛋白質
的pI 都小於8.3 ，因此都帶負電往正極跑 ，但若蛋白質pI = 8.3 就跑不動。
EPA 2018
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