EP6色谱分离技术-仪器信息网.PDF

EP6 EP6 EEPP66色谱分离技术 色谱分离技术是多级分离方法，样品组分要分配到两相中，一种是固定相，一种 是流动相。固定相可能是一种固体或者是固体上支持的液体或凝胶。固定相可以填充 到柱中，或涂布为一层，或分散为一个薄膜等。流动相可能是气态或液体或超临界流 体。分离原理可能是基于吸收、质量分布、离子交换等，或可能基于分子的理化性质 不同，如粒度、质量、体积等。 本章包括系统适应性一般参数的定义和计算，以及一般适用性要求。在下列章节 给出了分离原理、仪器和方法： --纸层析（2.2.26） --TLC 色谱法（2.2.27） --气相色谱法（2.2.28） --液相色谱法（2.2.29） --分子排阻色谱法（2.2.30） --超临界流体色谱法（2.2.45） 定义 下列定义用于计算专论中的限度。 对于某些设备，某些参数（如信噪比）可以用生产商提供的软件计算。用户有责 任确保软件中的计算方法与欧洲药典的要求相一致。如果不同，必需进行校正。 色谱图 一张色谱图是检测器响应值、流出浓度或其他数量的绘图的或其他标示，作为流 出浓度、时间、体积或距离的一种测量。理想的色谱图是基线上出现高斯峰。 保留数据 保留时间和保留体积 洗脱色谱法中的保留测量可能是保留时间（t ），由色谱图中最大峰的位置直接进行定 R 义。保留体积(V )可以通过保留时间来计算： R V =v×t R R t =保留时间或沿基线从进针处到相应组分的最大峰垂直处之间的距离。 R v=流动相的速率。 质量分布比率 质量分布比率（Dm）（也称为容量因子 k’或保留因子k）规定如下： 固定相中溶质数量 Vs Dm= =Kc 流动相中溶质数量 VM Kc=平衡分布系数（也称为分布常数） Vs= 固定相体积 V = 流动相体积 M 一个组分的质量分布比率可以使用下列公式从色谱图中测定： t -t R M Dm= tM t =保留时间（或体积）或沿基线从进针处到相应组分的最大峰垂直处之间的距离。 R t =保持时间（或体积）：时间（或体积）或沿基线从进针处到一个未保留组分的最大 M 峰垂直处之间的距离。 分布系数 在分子排阻色谱法中，一个特定柱子中的一个组分的洗脱性质可以通过分布系数（Ko） 表示，计算公式如下： t -t R o Ko= t-t t o t =保留时间（或体积）或沿基线从进针处到相应组分的最大峰垂直处之间的距离。 R t =保持时间（或体积）：时间（或体积）或沿基线从进针处到一个未保留组分的最大 o 峰垂直处之间的距离。 t=保留时间（或体积）或沿基线从进针处到相应的一个组分的最大峰垂直处之间的距t 离，这个组分可以全部通过固定相的小孔。 延迟因子 在平面色谱法中，延迟因子（R ）（也称为保留因子R）是从原点到斑点中心的距离 F f 与原点到溶剂前沿的距离的比值。 b R = F a b= 分析物的移动距离 a=溶剂前沿的移动距离。 色谱数据 峰可以用峰面积（A）、或峰高（h）和半峰高的峰宽（w ）、或峰高和变形点之间的 h 峰宽（w）来定义。在高斯峰（图2.2.46.-1）中有如下关系：i w =1.18w h i 图2.2.46.-1 对称因子 一个峰的对称因子（As）（或拖尾因子）（图 2.2.46.-2）计算如下： w0.05 As= 2d w = 在峰高的二十分之一处的峰宽， 0.05 d= 最高峰的垂直处与二十分之一峰高处的的前边沿处之间的距离。 值1.0表示完全（理想）对称。 图2.2