高效液相色谱中的化学衍生法.pdfVIP

综 述 高效液相色谱 中的化学衍生法 邱宗荫 李惠芝 曾少波 重（庆医科大学） 色谱技术中的化学衍生法系指在色谱过程中用 进展特别是与生命科学有关的内容作一综合介绍。 特殊的化学试剂 一（般称为衍生化试剂或标记试 用于紫外 可见检测的衍生化方法 剂）使样品成分转变相应的衍生物之后进行分离检 测或进行检测的方法。近十年来，化学衍生法在高 一（）检测脂肪族醇、醛、酮、羧酸的衍生化 效液相色谱法中的应用受到重视，发展较快。在高 试剂 效液相色谱法中，化学衍生化的目的为：1．将紫外 上述脂肪族化合物在紫外光区无明显吸收，引 —可见强吸收功能基团引入被检测对象或将其转变 入在紫外光区有强吸收的基团，就可进行紫外检 为荧光衍生物，以提高检测灵敏度；2提高对分析 测。常用的紫外衍生化试剂如表1所列。 样品的分离和选择性。 二（）氨基酸的衍生化方法 从是否与HPLC系统联机的角度，化学衍生 目前氨基酸分析仪所用的衍生化方法多为茚三 法分为在线online）与离线 O∣ffline）两种。从 酮法及邻苯二甲醛法。前者在可见光区检测，后者为 发生衍生化的场合，分为柱前衍苌生法╬pre-column 荧光检测。随着反相HPLC的发展，又确立了数 derivatization）与柱后衍生法 p（ost-columnderi- 种衍生化方法。此处先介绍在紫外或可见光区进行 vatization）两种。目前，在HPLC中，以离线的 检测的方法。 柱前衍生法 简（称柱前衍生法）与在线的柱后衍生 1.PTH氨基酸分析法[6]该法系用苯异硫 法 简（称柱后衍生法）使用居多。 氰酸酯 （ITC，通过柱前衍生将氨基酸转变为2- 有关HPLC中的化学衍生法，曾有专著[1]、 乙内硫酰脲衍生物 （PTH氨基酸），经反相色谱分 专章[2,3]、综述[4,5]介绍，本文就近年来较突出的 离后，在269nm或254nm检测。 phy?.in hInternationalTopicalMeeting [21]E.Voigtman,etal.,J.Liq.Chromatogr., on Photoacoustic,Thermaland Related 5,2113(1982). Sciences,TechnicalDigest,ThB2.1,Quebec, [22]E.Voigtman,etal.,Anal.Chem.,54.1834 Canada,1985. (1982). [14]V.PZharov,etal.J.Mol.Struct.,115, [23]E.P.C.Lai,etal.,Appl.Opt.,21,3126 261(1984). (1982. [15]V.P.Zharov,etal.,LaserChem,1,163 [24]E.P.C.Lai,etal.,Anal.Chem.,55,2441 (1983). (1683). [16]B.. apoB,Tak aee,o .AHCCCP, [25]E.P.C.Lai,etal.,Chromatogr,15,645 269,1079(983). (1982). [17]B.. apoB,Tak aee,AHaH.XM., [26]E.Voitman,etal.,J.Liq.Chromatogr, 39,551(1984). 6,1275(1983). [18]