RNA干扰技术和其在蜜蜂基因功能研究中的应用前景.pdf

中国畜牧兽医 2011年第38卷第1期 生物技术 ·105· RNA干扰技术及其在蜜蜂基因功能 研究中的应用前景 刘楠楠，薛运波，王志，李志勇，高启臣 (吉林省养蜂科学研究所，吉林吉林132108) 摘要：RNA干扰作用(RNA 因功能的有效手段。作者重点介绍了RNA干扰技术发现的历史过程和作用机制，阐述了其在昆虫功能基因组学方面的应用 进展，展望了其在蜜蜂基因功能研究中的应用前景。 关键词：RNA干扰技术；蜜蜂；基因功能 中图分类号：Q75 文献标识码：A 文章编号：1671—7236(2011)01—0105—03 RNAi(RNAinterference)即RNA干扰，是近胞的进一步研究中，这种现象也得到了确认。直到 两年来产生的新兴生物技术，指通过反义RNA与 1998年，科学家才真正认识到这种分子的力量。 正链RNA形成双链RNA特异性地抑制靶基因的 Fire等将外源的双链RNA加入到秀丽新小杆线虫 转录后表达的现象，它通过人为地引入与内源靶基 的基因中，将体外转录得到的单链RNA经纯化后 因具有相同序列的双链RNA，从而诱导内源靶基因 注射人线虫，基因抑制效应即变得十分微弱，而经过 的mRNA降解，达到阻止基因表达的目的(Fire等， 纯化的双链RNA则能高效特异性地阻断相应基因 1998；Fire，1999)。 的表达，并将这种由dsRNA引发的特定基因表达 1 RNA干扰的发现 受抑现象称为RNA干扰作用，这是有关生物界 1998年华盛顿卡耐基研究员AndrewFire和RNA干扰存在的首次报道(陈忠斌等，2002)，证明 Mello在《自然》杂 马萨诸塞大学癌症中心的Craig 了小RNA分子是某些基因抑制现象的“幕后使 志上发表了一项研究成果，他们首次将双链RNA 者”。而在随后的两年内，人们相继发现RNA干扰 导入线虫基因中，并发现双链RNA较单链RNA能 现象广泛存在于植物、真菌、线虫、昆虫、蛙类、鸟类、 更高效地特异性阻断相应基因的表达，并称这种现 大鼠、小鼠、猴等几乎所有的真核生物中(Boaher 象为RNA干扰(Chuang等，2000)。他们的这一发 等，2000)。这种存在揭示了RNA干扰很可能是出 现也促使后来的科学家认识到，生物体的基因转化 现于生命进化的早期阶段。随着研究的不断深入， 最终产物不仅仅是蛋白质，还包括相当一部分 RNA干扰的机制正在被逐步阐明，作为功能基因组 RNA。其实早在20世纪70年代，人们就认识到了 学研究领域中的有力工具，也越来越为人们所重视。 RNA会影响生物体的整个生命活动，但当时人们对 RNA干扰的发现，为人类对生命的研究开辟了一个 于RNA的理解，还仅限于生物体的基因是由DNA 非常广阔的领域。 通过转录形成信使RNA，随后翻译形成蛋白质才能 2 RNA干扰的作用机制 起作用。1990年，Napoli等在对矮牵牛进行研究时 自RNA干扰现象报道以来，其机制的研究就 结果发现，将一个能产生色素的基因置于一个强启 成为一个热点，许多科学家对此进行了大量的研究， 动子后，导入矮脚牵牛中，试图加深花