FDA沙门氏菌检验标准中文版(一).docVIP

FDA沙门氏菌检验标准中文版（一） U.S. Department of Health and Human Services U.S. Food Drug AdministrationCenter for Food Safety Applied NutritionBacteriological Analytical Manual April 2003 沙 门 氏 菌 检 测FDA分析手册(2003年3月)第5章章节内容1、 简介2、 设备和材料3、 培养基和试剂4、 样品的制备5、 沙门氏菌的分离培养6、 沙门氏菌的鉴定7、 快速检测方法(附录1)8、 参考文献简介在第8版的BAM手册中，沙门氏菌的检测方法有了几个改变。第一个改变是RV培养基的广泛使用，即可用于检测含沙门氏菌量高的食品，又可于检测含沙门氏菌量低的食品，以前的版本中，RV培养基仅用于虾类的检测。依据AOAC反复研究的结果，RV培养基即可用于检测含沙门氏菌量高的食品，又可于检测含沙门氏菌量低的食品。除口香糖外的所有食品，RV培养基替代了SC培养基。此外，RV培养基取代了必须含有活性干酵母的LST肉汤培养基。TTB肉汤继续用于第二种选择性增菌培养基，包括口香糖在内的食品，在检测含菌量高的食品时需进行43培养；在检测含菌量低的食品时需进行35培养。第二个改变是对于冷藏食品前增菌和低水份食品选择性增菌培养的时间为72小时以内，这样，样品检测的时间最迟星期三或星期四可以开始，周末也不用加班。第三个改变是缩短了在LIA斜面上的培养时间，在以前的版本(BAM-7)中，TSI和LIA斜面在35培养的时间分别为24±2h和48±2h。未公布的一些资料表明，48小时后观察LIA斜面结果是没有任何诊断价值。对193个LIA斜面进行试验，培养24±2h后，所有的斜面都给出了正确的结果。再培养24h后，试验的结果没有什么重大的改变。所以，TSI和LIA斜面培养基现在改为培养24±2h。第四个改变是蛋壳表面灭菌步骤的改变。在以前的版本(BAM-7)中，蛋壳表面灭菌的方法是在0.1%的HgCl2溶液中浸泡1h，然后在70%的乙醇溶液中浸泡30分钟。HgCl2对人体是有害的，依据环境保护组织的要求进行处理，费用是非常昂贵的。在新版的手册（BAM-7）中，蛋壳表面的消毒只需通过浸泡在含0.1%SDS的次氯酸钠溶液(含Cl-200PPM)中30分钟。第五个改变是蛋类样品的制备。在检测前，蛋的内容物(蛋黄和蛋白)需进行完全混匀。之后，取25ml加入含硫酸铁的胰酪胨大豆肉汤中。本版中，制定了口香糖的检测方法。口香糖样品和增菌肉汤以1：9的比例进行混合，得到的混合物非常粘，不易被吸管吸出。另外添加纤维素酶时，容易被吸管吸出。由于最近桔子汁相关事件的发生，其检验方法也己制定出，被检的桔子汁包括经巴氏消毒和未经巴氏消毒的。从选择性平板上挑菌落说明更明白和科学。如果在选择性平板上没有可疑的典型菌落，建议挑取几个非典型菌落接种到TSI和LIA培养基上。由于在过去的几年里，FDA的科学家们从一些食品中，特别是从海产品中分离出沙门氏菌，其中4%左右在选择性平板是非典型菌落。最后，自成BAM-7发行以来，已经制定出6种培养基的使用说明。包括3种选择性培养基（BS琼脂、HE琼脂和XLD琼脂）和3种比较新的培养基(EF-18、XLT、Rambach 琼脂)。我们的实验结果证实，用一种或几种新的培养基来取代BAM中推荐的培养基是不理想的。因些，我们一直保留下来。A、设备和材料1、 搅拌器和无菌搅拌杯2、 无菌500ML广口螺口三角瓶、无菌500ML长颈三角瓶、无菌250ML烧杯、无菌玻璃漏斗、无菌采样器3、 无菌玻璃涂布捧或塑料涂布捧4、 电子天平，精度0.1g，最大量称2000g5、 电子天平，精度5mg，最大量称120g6、 培养箱：35±27、 冰箱：4±28、 水浴箱：49±19、 循环的、温度可调的水浴箱：43±0.210、循环的、温度可调的水浴箱：42±0.211、无菌药匙或其它合适的工具：用于称样品12、无菌培养皿：15X100MM，玻璃或一次性的13、1ml无菌吸管,刻度0.01ml、5ml和10ml无菌吸管,刻度0.1ml14、接种针和接种环15、无菌试验试管或培养试管：16X150MM和20X150MM血清学鉴定管：10X75MM或13X100MM16、试管架17、旋转混合器18、无菌剪刀、大剪刀、解剖刀及镊子19、灯：用于观察生化反应20、电炉21、PH试纸：PH值6-8，最大变色范围在0.4PH单位22、PH计23、28X37CM的无菌塑料袋，易拉口(在第23-24节中，检测蛙腿和兔体时用)