2017_2018学年高中生物第三章酶的制备及活力测第一节酶的制备及活力测定学案中图版选修.docVIP

第一节　酶的制备及活力测定 1．研究酶的存在和简单制作方法。 2．尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。 1．提取方法 酶是在生物体活细胞中合成的。多数酶在细胞内直接参与生物化学反应，少数的酶要分泌到细胞外发挥作用。提取存在于细胞内的酶，需要破碎生物组织细胞，可用破碎仪、研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎，使酶从活细胞中释放出来，进入细胞外的溶液中，经过滤、离心制备成粗酶液。唾液淀粉酶、胰蛋白酶等分泌到细胞外的酶，可以直接从动物分泌物或细胞外的组织间隙中提取。 2．提取过程中影响酶活力的因素 在酶的提取过程中，温度、酸碱性等多种环境条件都可能影响酶的空间结构，导致酶变性，直至丧失活力。 1．酶的活力检测指标 酶的活力通常以单位时间内底物的消耗量或者在单位时间内产物的生成量来表示。例如，通过测定单位时间内麦芽糖的生成量来检测淀粉酶的活力。由于麦芽糖与3,5二硝基水杨酸试剂反应，能生成黄褐色产物，因此，利用分光光度法进行比色，可以测出麦芽糖的生成量。另外，还可以通过测定单位时间内淀粉的消耗量来检测淀粉酶的活力。 2．分光光度法 分光光度法是通过直接测定溶质对光的吸收能力来确定溶液浓度的方法。在定量分析时，首先配制一系列浓度梯度的标准溶液，在分光光度计上，选取特定的波长，测出它们的吸光值。以各种标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。比色测定待测样品时，操作条件应与绘制