2017_2018学年高中生物第三章酶的制备及活力测第四节酶的固定化学案中图版选修.docVIP

第四节　酶的固定化 1．说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 2．尝试制备固定化大肠杆菌细胞。 一、酶的固定化 1．固定化酶 概念：通过物理或化学的方法，将水溶性的酶与不溶性的载体结合，使酶固定在载体上，并在一定的空间范围内进行催化反应，这样制成的酶称为固定化酶。 2．酶的固定化方法 共价键结合法：将酶通过化学反应以共价键结合到尼龙等载体上。 包埋法：将酶均匀包埋在琼脂糖凝胶等多孔性的凝胶中的固定化方法。 3．固定化酶的特点 活性稳定，可以反复使用多次。在生产中，固定化酶能与反应液相互分开，不与产品混合，制品较易纯化，在大规模生产时所需工艺设备简单易行。 4．固定化酶的实例：木瓜蛋白酶的固定化 （1）酶的固定化。 在啤酒生产过程中，刚酿制的啤酒往往含有少量的蛋白质而显得浑浊。加入木瓜蛋白酶，可以使蛋白质水解成氨基酸，供酵母菌增殖所需，从而缩短发酵时间，提高啤酒产量，使酒质澄清醇和。 将尼龙布浸入等体积的CaCl2溶液和甲醇溶液中，室温下放置10 s左右，并轻轻搅拌至尼龙布发黏。取出后用水冲洗，并用吸水纸吸干。将尼龙布放入盐酸中，室温下水解，用蒸馏水洗至pH中性。再将尼龙布放入戊二醛溶液中，室温下浸泡20 min。取出后用磷酸缓冲液（pH＝7.8）反复洗涤，洗去多余的戊二醛，吸干后立即放入木瓜蛋白酶溶液中，4 ℃下固定3.5 h。取出尼龙布后用NaCl溶液洗去多余的蛋白酶，即得到尼