第6章吸光光度法-2017年11月.PDFVIP

第6章 吸光光度法 Spectrophotometry 1 6.1 吸光光度法概述 6.1.1 吸光光度法分类及特点 1、分类： 比色法 紫外吸光光度法 吸光光度法 可见吸光光度法 红外光谱法 2 2、特点: (1)灵敏度高：测定含量为 1% ~ 10-3 % 的微量组分及测定含量为 10-4 % ~ 10-5 %的痕量组分。 (2)准确度较高： 比色法 相对误差5 % ~ 10 % ； 分光光度法 相对误差 2 % ~ 5 % 。 (3)应用广泛，操作简便、快速。 6.1.2 比色法和可见吸光光度法测定过程 被测物 + R 显色反应 MRn 有 M试液 显色剂 色化合物 溶液 ↓ 根据 比色测定或可见 A计算 ← 分光光度计测定 结果 MRn 的吸光度A 6.1.3 有色化合物颜色和吸收光谱 1、可见光区的各种光： 可见光： 波长大约在 400 ~750 nm 范围内，人眼能感觉到的光。 由七种色光组成。 色 光： 有颜色的光。每种色光具有一定的波 长范围，如绿色光： 500~560nm， 黄色光：580~600nm 。 单色光： 只具有一种波长的光。 如波长为 470 nm 的光就是单色光。 互补色光与白光：两种色光如按照一 定比例混合，可成为白光，则这两种色光 称为互补 色光。 2、有色化合物溶液的颜色 溶液中有色化合物分子中的价电子由于 d—d 能级跃迁，可以选择性吸收不同波 长的互补色光中的一种色光而让另一种 色光透过溶液，被人眼所感觉。故有色 化合物的颜色为透过光的颜色。 8 3、有色化合物的吸收光谱： 是分子吸收光谱，即分子中价电子 能级跃迁而产生的吸收光谱。 hc 根据 E E为光量子能量 λ c 为光速，λ为波长， h为普朗克常数 hc 根据 E λ 由d—d 能级跃迁所需能量 E 可计算 出有色化合物吸收的光的波长λ 。 由λ 的范围可知， 有色化合物的吸收光谱位于可见光部 分。 4、吸收光谱(absorption spectrum） 曲线或光吸收曲线 (1)定义