绿叶中色素的提取和分离.ppt

1.实验原理 (1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇(或丙酮)中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中的色素。 (2)色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得慢，因而可用层析液将不同色素进行分离。 2．实验流程 基本技术要求 (1)实验成功的关键 ①叶片要新鲜、颜色要深绿。 ②滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液挥发。 ③滤液细线不仅要细、直，而且要含有比较多的色素。 ④滤纸上的滤液细线不能没入层析液中。 (2)注意事项 ①制备定性滤纸条时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 ②根据烧杯的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出烧杯1 cm，高出的部分做直角弯折。 ③画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中。 ④研磨要迅速、充分。a.因为无水乙醇容易挥发；b.为了使叶绿体完全破裂，从而能提取较多的色素；c.叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。 ⑤制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角，这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀，便于观察实验结果。 (1)从色素带的宽度可推知色素含量的多少； (2)从色素带的位置可推知色素在层析液中溶解度大小； (3)在滤纸上距离最近的两条色素带是叶绿素a与叶绿素b，距离最远的两条色素带是胡萝卜素与叶黄素。 (1)甲同学利用新鲜的玉米绿色叶片进行“绿叶中色素的提取和分离”实验，在滤纸条上出现了四条清晰的色素带，其中呈黄绿色的色素带为________。 (2)该同学改变层析液组成后继续进行实验，滤纸条上只出现了黄、绿两条色素带，他用刀片裁出带有色素带的滤纸条，用乙醚分别溶解条带上的色素，浓缩后用一分析仪器检测，通过分析色素溶液的________来判断条带的色素种类。 (3)实验结束几天后，乙、丙两同学发现部分预留叶片已变黄，乙同学认为这是由于叶片中某些色素降解所造成的，丙同学则认为某些色素含量增加。根据所学知识，你将如何设计实验来判断两个同学的观点是否正确？ _________________________________________________。 思路点拨：本题主要考查色素提取与分离实验的相关问题，解题应注意以下方面： ①明确绿叶中色素的种类、颜色及吸收光谱?(1)(2)两问答案。 叶绿体的四种色素中，叶绿素b呈黄绿色，黄色色素带含有叶黄素、胡萝卜素，绿色色素带含有叶绿素a、叶绿素b，它们的吸收光谱不同，因此可用吸收光谱判断。要判断叶片变黄是由于某些色素分解还是某些色素增加造成的，可通过变黄叶和未变黄叶色素提取和分离的结果作对照，比较两组色素的组成及含量来判断。 答案：(1)叶绿素b　(2)吸收光谱　(3)从预留的叶片中挑选出足量的、重量相等、大小相近的已变黄的叶片和尚未变黄的叶片为实验材料，在相同条件下，再次进行叶绿体色素的提取和分离实验。测定和记录实验结果，比较这两种叶片各种色素的组成及含量后，得出结论 3．叶绿体离开细胞，保持适宜条件仍可进行光合作用；低于0℃时有些植物仍可进行光合作用，如两极地区的地衣植物。 4．温度改变，不管光反应还是暗反应均受影响，但主要影响暗反应，因为暗反应不管酶的种类还是数量都比光反应多。 5．细胞中[H]、ATP、C3、C5等物质含量的改变是在外界条件改变(如停止光照、停止CO2供应)的短时间内发生的，且是相对含量的变化。分析时应结合暗反应CO2的固定和C3的还原过程图解，从来源和去路两个角度分析，方能得出正确结论。 6．要弄清题干给出的是净光合作用还是实际光合作用，要求的是净光合作用还是实际光合作用。其中关键理解几种说法，如光照下CO2的吸收量——是说净光合作用；光合作用过程同化的CO2的量——是说实际光合作用；光合作用制造的有机物——是说实际光合作用；积累的有机物的量——是说净光合作用；光合作用过程产生的O2量——是说实际光合作用；吸收CO2的量或放出的O2量——是说净光合作用。 【错题实录】 [2010·福建理综卷]东海原甲藻(简称甲藻)是我国东海引发赤潮的藻种之一，研究甲藻光合作用的生理特性可为认识赤潮发生机理提供重要信息。 (一)某研究小组探究pH对甲藻光合作用的影响，设计了以下实验： 将生长旺盛的甲藻等量分成5组培养，各组藻液pH分别设定为6.0、7.0、8.0、9.0、10.0，在黑暗中放置12h，然后在适宜光照等相同条件下培养，随即多次测定各组氧气释放量并计算净光合速率，将实验结果绘制成下图。 (1)本实验除了通过测定氧气释放量，还可以通过测定________________吸收量来计算净光合速率。 (2)黑暗放置过程中，藻液pH会有所变化，因此在测定氧气释放量前，需多次将各组pH分别调到_____________