产纤维素酶真菌的分离、筛选及酶活测定.doc

产纤维素酶真菌的分离、筛选及酶活测定 摘 要产酶纤维素微生物在纤维素资源的再生转化，提高牲畜饲料利用率，堆肥的使用以及环境污染等方面具有很高的应用价值。而分离高效纤维素降解菌是这一内容的前提与基础。本研究利用选择培养基CMC培养基，从的土壤中分离得到6株降解纤维素的真菌。它们都具有较强的纤维素降解能力，尤其以编号为纸绿和江白活性最高。随后对这6菌株进行得到一株高酶活的菌株在CMC培养条件下达到40 U 关键词：；筛选；纤维素酶活；鉴定Separation, screening and enzymatic activity of cellulase produced by fungi Abstract Microbial fermentation of cellulose micro-organisms, especially fungi in the conversion of cellulose into renewable resources and improve utilization of livestock feed, compost use and environmental pollution has a high application value. And efficient cellulose degradation bacteria can provide useful help in this regard. In this study, selective medium CMC medium, Shaoyang University straw isolated six soil fungi degrade cellulose. They have a strong ability of cellulose degradation, particularly in the number of paper green and White River the highest activity. And the 6 strains with a high activity were morphological, physiological and biochemical identification. Key Words: Cellulose degrading bacteria; Filter; Cellulase activity; Identification. 目 录 摘 要 I Abstract II 1 前言 1 1.1 纤维素概述 1 1.2 纤维素酶 2 1.3 纤维素分解菌类 4 1.4 本文研究的目的与意义 6 2 实验部分 6 2.1 材料 6 2.2 主要试剂与仪器 6 2.3 培养基 8 2.4 菌种的分离与筛选 9 2.5 纤维素酶活性测定 10 2.6 形态特征观察 12 2.7 生理生化特性鉴定 12 2.8 菌种保藏 13 3 结果与讨论 13 3.1 初筛选得到的各菌株的菌落形态特征描述 13 3.2 复筛获得的菌株图片 14 3.3 葡萄糖标准曲线的绘制 16 3.4 各菌的酶活力测定结果 17 4 结论 17 参考文献 18 致谢 20   1 前 言 纤维素是自然界中存量最大的一类可再生资源全世界每年产农作物秸秆吨。我国是一个农业大国，又是一个畜牧业大国。据粗略统计，我国每年产生农作物秸秆约7亿吨，含大量未降解纤维素组分的禽畜粪肥173亿吨。然而，由于纤维素中存在许多高能氢键，因此其水解、利用较困难，目前只利用了其中很小的一部分，大部分的纤维素类物质都被弃置，既浪费资源又会对环境造成极大的污染。因此合理开发和科学利用这一丰厚的天然资源已成为研究开发的一个重点领。 微生物在自然界纤维素的降解中有着举足轻重的作用。我国纤维素酶的研究已有几十年的历史，并且已筛选出一批纤维素酶产生菌种。目前，用于生产纤维素酶的微生物大多属于真菌，如木霉属(Trichoderma)、曲霉属(Aspergillus)和青霉属(Penicillium)[2] 。然而，用于纤维素酶生产的菌株普遍存在酶活力较低的问题[3]。因此，筛选优良菌种是提高纤维素酶活力，从而提高纤维素降解效率的关键。 1.1 纤维素概述纤维素是植物体中最重要的组成成分之一，是细胞壁的主要组成成分，约占植物干重的40以上。据粗略估计，全世界纤维素的资源约为70亿吨，而每年经绿色植物光合作用合成的纤维素产量高达40亿吨。因此，毫无疑问，纤维素是公认的地球上数量最丰富的可再生有机物质资源。从结构上看，纤维素是由许多个葡萄糖分子通过β1,4-糖苷键连接而成的直链聚合物多糖。