微生物的培养基灭菌.pptVIP

培养基灭菌 掌握不同器皿灭菌前的包扎方法及操作 掌握培养基灭菌方法及操作 二、实验原理 湿热灭菌原理：高压蒸汽灭菌是利用高压蒸汽产生的高温，以及热蒸汽的穿透能力使蛋白质变性或凝固。 三、实验步骤 加水于灭菌器内到规定的水位 ； 把待灭菌的物品放入灭菌锅； 加盖（关闭灭菌锅盖） 密封（旋紧螺栓，切勿漏气） 排气（打开放气阀，加热，热蒸汽上升，以排除锅内冷空气，排气约5~ l0min，关闭放气阀） 灭菌20~30min 降压（待压力自然降至0 ） 开盖取物（放气阀不能打开过早，否则突然降压致使培养基冲腾，使棉塞、硅胶泡沫塞沾污，甚至冲出容器以外。） 三、实验步骤 1)、把要灭菌的物品放在箱内,堆积时要留有空隙,勿使接触器壁,铁壳,关闭箱门. 2)、接通电源,把位于箱顶的通气孔适当打开,使箱内湿空气能逸出,至箱内温度达到100℃时关闭. 3)、调节温度控制器旋钮,直至箱内温度达到所需要温度位置,观察温度是否恒定.若不稳定,再行调节,稳定后不可再拨动调节旋钮和通气孔,保持140~ 160℃,2~3h. 4)、灭菌结束后切断电源,待箱内温度降至60℃时,才能打开箱门取出灭菌物品.同时,应将温度调节旋钮调到零点,并打开通气孔. 灭菌后，倒平板，标记培养基名称，编号和实验日期。 制备试管斜面培养基，试管上标记培养基名称，编号和 实验日期。 实验无菌器皿的准备 无菌水：在试管或三角瓶内量取实验所需的自来水， 经 121℃ 20min灭菌。 无菌移液吸管、培养皿：报纸包扎后，经121℃，20min灭菌。 干热灭菌和湿热灭菌时间长短为什么有较大差距？ 湿热灭菌时，当灭菌时间达到设定要求，但压力未降至0时，能否打开放气阀或直接打开灭菌锅盖？说明原因。 一、实验目的要求 干热灭菌原理：加热可破坏蛋白质和核酸中的氢键，故导致核酸破坏，蛋白质变性或凝固，酶失去活性，微生物因而死亡。 湿热灭菌步骤 干热灭菌步骤 注意，4人1组，每1组制备1瓶无菌水，实验结束后，每个实验室需要安排人打扫卫生 思考题: 培养基：按照微生物生长繁殖所需要的，用人工方法配制而成的适合于微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。