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烟管菌漆酶的分离纯化及部分酶学性质研究
Mycosystema
菌 物 学 报 15 March 2008, 27(2): 297-308
jwxt@
ISSN1672-6472 CN11-5180Q
©2008 Institute of Microbiology, CAS, all rights reserved.
烟管菌漆酶的分离纯化及部分酶学性质研究
1，2 2* 1 1 1
王剑锋 王璋 饶军 李江 白涛
1 东华理工大学生物系 抚州 344000
2 中国食品发酵工业研究院 北京 100027
摘 要：烟管菌 Bjerkandera adusta WZFF.W-Y11 漆酶粗酶液经过丙酮分级沉淀、DEAE-Cellulose 离子交
换层析、Sephadex G-100 凝胶过滤，得到了三种电泳纯的漆酶同工酶，总酶活回收率达到 65.5%，其中
LacA 平均纯化了 29.2 倍，LacB 纯化了 5.1 倍，LacC 纯化了 18.5 倍；三种同工酶的分子量分别为 LacA ：
68.7kDa、LacB ：80.2kDa、LacC ：77.2kDa 。LacA 、LacC 氧化愈创木酚的 Km 大于氧化 ABTS 的Km ，最
适作用温度在 45-70 ℃，最适反应pH3.0-5.5 ，65℃时LacC 比LacA 稳定，LacC 在 pH3.5-6.0 稳定，LacA
在 pH5.0-9.0 稳定，Al3+ - 3+ 2+
对 LacA 、LacC 的酶活有促进作用，Cl 、Fe 、Hg 抑制 LacA 、LacC 的酶活，
Cu2+抑制 LacC 的酶活，而对LacA 的活性没有明显影响。
关键词：同工酶，丙酮分级沉淀，凝胶过滤，愈创木酚
Purification and characterization of laccase from
Bjerkandera adusta WZFF.W-Y11
1 2* 1 1 1
WANG Jian-Feng WANG Zhang RAO Jun LI Jiang BAI Tao
1Department of Biology, East China Institute of Technology, Fuzhou 344000, China
2 China National Institute of Food and Fermentation Industries, Beijing 100027, China
Abstract: Three kinds of laccases from Bjerkandera adusta WZFF.W-Y11 were purified to electrophoretic
homogeneity by the combination of acetone fractionation, DEAE-Cellulose ion exchange, and Sephadex G-100
chromatography. They were identified by the color development of zymogram stained with guaiacol after
*
Corresp
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