利胆汤对大鼠利胆作用实验探究.docVIP

利胆汤对大鼠利胆作用实验探究 　　[摘要] 目的 观察利胆汤对Wistar大鼠的利胆作用。 方法 Wistar大鼠50只，每组10只，随机分为0.9%氯化钠组、胆宁片组[0.54 g/（kg·d）]、利胆汤低剂量组[6 g/（kg·d）]、中剂量组[12 g/（kg·d）]、高剂量组[24 g/（kg·d）]。各组均采用灌胃给药3 d后，测量胆总管引流后1、2、3、4 h各组的胆汁量，检测胆汁中总胆汁酸、总胆固醇和总胆红素的含量。 结果 利胆汤三个剂量组在不同时间段上的胆汁流量均比0.9%氯化钠组明显增加（P 0.05）。 结论 利胆汤三个剂量组对Wistar大鼠都有明显的利胆作用，明显增加胆汁中胆汁酸含量，降低胆固醇和胆红素的含量，以高剂量组作用最为明显，但三个剂量组间胆汁成分含量差异不明显。 [关键词] 利胆汤；利胆作用；总胆汁酸；总胆固醇；总胆红素 [中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）12（b）-0021-03 胆结石是胆囊结石、胆总管结石、肝内胆管结石的总称，是外科临床上的常见病、多发病，其发病率有逐年上升的趋势。目前西医治疗多采用手术方法，但由于手术存在风险和并发症， 多数患者不愿接受或不能耐受手术治疗，而西药保守治疗的副作用较大且价格贵。近年来，中药治疗胆石症取得较好的疗效，具有副作用小、价格低廉等优点。利胆汤是北京中医药大学附属北京市中西医结合医院临床治疗胆石症的有效验方，经多年临床观察证实，对肝胆气滞型和肝胆湿热型胆囊结石均有较好的临床疗效[1]。本实验进一步观察利胆汤对Wistar大鼠的胆汁分泌量及胆汁中总胆汁酸（TBA）、总胆固醇（TC）和总胆红素（TB）含量的影响，探讨利胆汤的利胆作用，从转化医学角度为临床应用利胆汤治疗胆囊炎、胆石症提供理论依据。 1 仪器与试药 1.1 动物 选用雄性Wistar大鼠50只，SPF级，体重（260±20）g，由维通利华实验动物中心提供。 1.2 试剂和药品 利胆汤（组方：柴胡10 g，茵陈10 g，枳实10 g，木香10 g，金钱草10 g，白芍15 g，炙甘草10 g，厚朴10 g，大黄6 g，乌药10 g，川芎10 g）浓煎至生药含量1.2、2.4、4.8 g/mL，4℃保存备用，以上中药浓煎剂均由北京市中西医结合医院药剂科提供；胆宁片（规格：100#×0.36 g）批号由上海和黄药业有限公司生产；TBA试剂盒，批号TB试剂盒，批号TC试剂盒，批号均由上海华氏亚太生物制药有限公司提供。 1.3 仪器 日立7180全自动生化分析仪。 2 方法与结果 2.1 造模与给药 取Wistar大鼠50只，随机分成5组，即0.9%氯化钠组、胆宁片组[0.54 g/（kg·d）]、利胆汤低剂量组[6 g/（kg·d）]、中剂量组[12 g/（kg·d）]、高剂量组[24 g/（kg·d）]，每组各10只。各组均采用灌胃给药3 d后，实验前12 h禁食。实验时，大鼠用10%水合氯醛4 mL/kg腹腔注射麻醉后，仰卧固定于动物手术板上，于上腹部正中约3 cm切口，打开腹腔，在十二指肠降部肠系膜中找到白色透明韧性胆管，先分离出十二指肠乳头端的胆管约2 cm，再向肝脏方向插入直径0.7 mm密闭式静脉留置针，结扎固定密闭式静脉留置针，拔出针芯，可见针管内有淡黄色胆汁流出，用1.0 mL离心管收集胆汁。待手术大鼠模型稳定20 min后，开始收集胆汁，每1小时收集1次，共收集4 h，并记录流量。 2.2 观察指标及测定 2.2.1 胆汁分泌量 各组分别于0～1 h、 1～2 h， 2～3 h， 3～4 h共4个时间段收集胆汁，用注射器吸出全部胆汁，计量体积[5]。 2.2.2 胆汁生化测定 采用化学氧化法测定胆汁中TB；采用酶比色法测定TC含量；采用酶循环法测定TBA含量。 2.3 统计学方法 采用统计软件SPSS 17.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，组间比较用单因素方差分析，采用t检验。以P 0.05）。表明利胆汤能增加胆汁中胆汁酸的含量，降低胆汁中胆固醇及胆红素的含量。见表2。 3 讨论 胆结石主要包括胆固醇结石和胆色素结石，其形成机制与胆汁成分的变化密切相关[6]。结石的形成包括胆汁成分的析出、沉淀、成核及积聚增长等基本过程。胆固醇结石的主要成分为胆固醇、胆汁酸和卵磷脂等，其形成机制为：①胆汁中的胆固醇过饱和；②胆固醇在胆汁中成核呈结晶状沉淀；③结晶体聚集和融合，遍布于胆囊壁的黏液、凝胶里，导致胆