乳腺特异性表达催乳素基因载体的构建与检测-中国细胞生物学学报.pdfVIP

乳腺特异性表达催乳素基因载体的构建与检测-中国细胞生物学学报.pdf

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中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2016, 38(5): 519–526 DOI: 10.11844/cjcb.2016.05.0014 乳腺特异性表达催乳素基因载体的构建与检测 1,2 1,2 1 1 1 1* 1* 任艳萍 雷小灿 谢亮亮 罗 婵 刘晓华 石德顺 李湘萍 1 2 ( 广西大学, 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁 530004; 遵义医学院基础医学院, 遵义 563003) 摘要 催乳素(prolactin, PRL)可通过PRL-PRLR-JAK/STAT信号通路促进乳腺发育, 启动并维 PRL 报PRL 持泌乳。为了探讨调控 基因表达对奶水牛产奶量的影响, 该研究构建了乳腺特异性表达 基 PRL 因的核移植载体并检测了其有效性。首先, 利用RT-PCR方法克隆得到804 bp的水牛 基因编码 PRL β β BCN 区; 而后逐步采用酶切加连接方法, 依次将 基因、 -酪蛋白( -casein, )启动子和标记基因插 PRL 入pIFN-BCNpolyA质粒中, 构建得到14.2 Kb的转 基因载体。将表达载体瞬时转染人Bcap-37细 PRL 学 胞系, 经RT-PCR检测发现, 目的基因 可在该细胞系中表达。将该载体转入水牛胎儿成纤维细胞 中, PRL PRL 通过核移植法获得了转 基因水牛克隆胚胎。该文结果表明, 所构建的 核移植载体可表 PRL PRL 达 基因, 并可用于生产转 基因克隆水牛胚胎。 关键词 PRL; 乳腺特异性表达; 载体构建; 转基因动物; 核移植 学 The Construction and Detection of Nuclear Transfer Vector Specifically Expressing PRL Gene in the Mammary Gland 物 1,2 1,2 1 1 1 1*, Li Xiangping1* Ren Yanping , Lei Xiaocan , Xie Liangliang , Luo Chan , Liu Xiaohua , Shi Deshun 1 ( State Key Laboratory of Subtropical Bioresource Conservation and Utilizati

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