同型半胱氨酸对人thp-1巨噬细胞il-8mrna-中国病理生理杂志.pdfVIP

( ) ·1690 · 中国病理生理杂志 　Chinese Journal of Pathophysiology 　2004 ,20 9 :1690 - 1693 ( ) [文章编号] 　1000 - 4718 2004 09 - 1690 - 04 同型半胱氨酸对人 THP - 1 巨噬细胞 IL - 8 mRNA 及其蛋白表达的影响 朱建华 , 　彭文辉 (浙江大学医学院附属第一医院心内科 , 浙江 杭州 310003) ( ) 　　[摘 　要] 　 目的:探讨同型半胱氨酸 Hcy 对人 THP - 1 巨噬细胞 IL - 8 mRNA 的表达和 IL - 8 分泌的影响 。方 μ ( ) 法 :在由01 mol/ L 佛波脂 PMA 诱导分化的人 THP - 1 巨噬细胞中加入不同浓度的 Hcy ,并孵育不同时间。用酶联 ( ) 免疫吸附法 ELISA 检测培养上清液中 IL - 8 蛋白的含量 ,用半定量 RT - PCR 法检测 IL - 8 mRNA 表达 。结果 :经 PMA 诱导后 ,THP - 1 细胞贴壁生长 ,分化成巨噬细胞 。在一定浓度范围之内,Hcy 呈剂量依赖性刺激 THP - 1 巨噬细 ( ) 胞分泌 IL - 8 蛋白,005 mmol/ L Hcy 即可促进其分泌增加为对照组的 128 倍 P 001 ;020 mmol/ L Hcy 使 IL - 8 ( ) 的产量增加到对照组的 155 倍 P 001 。010 mmol/ L Hcy 干预后 ,IL - 8 蛋白在 3 h 即高于对照组 ,到 48 h 仍明显 高于对照组 。半定量 RT - PCR 结果也显示 Hcy 能刺激 IL - 8 mRNA 表达 ,呈剂量和时间依赖关系 。结论 :Hcy 能促进 人 THP - 1 巨噬细胞 IL - 8 mRNA 表达和分泌 IL - 8 蛋白。这可能为其诱导动脉粥样硬化的重要机制之一 。 [ 关键词] 　高半胱氨酸 ; 巨噬细胞 ; 白细胞介素 8 ; 动脉硬化 　　[ 中图分类号] 　R363 　　　　　[文献标识码] 　A ( ) 　　同型半胱氨酸 homocysteine , Hcy 是蛋氨酸的代 司 ,Trizol 购 自 Invitrogen 公司 , PCR 引物 由上海博亚 谢中间产物 , 已知血浆 Hcy 水平升高是动脉粥样硬 公司合成 。M - MLV 逆转录酶 、oligo ( dt ) 18 购 自上海 ( ) [ 1] 生物工程公司 。Taq DNA 聚合酶为 Promega 公司产 化 atherosclerosis ,AS 的独立危险因素 ,但 Hcy 确 切的致病机制尚未完全阐明。目前认为 AS 是一种 品。IL - 8 酶联免疫吸附法试剂盒为 Benda 公司产 慢性炎症反应过程[2 ] ,其重要的特点之一是病程中 品。 炎性细胞