芦笋多糖对s180小鼠红细胞膜组分及流动性的影响-天津中医药大学.pdfVIP

2009 年12 月第26 卷第6 期 天 津 中 医 药 Dec． 2009, Vol．26 No．6 Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine 479 芦笋多糖对S180 小鼠红细胞膜组分及流动性的影响* 1，2，3 2，3，4 汲晨锋 ，季宇彬 （1．北京中医药大学中药学院，北京 100102；2． 国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心，哈尔滨 150076； 3．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心，哈尔滨 150076；4． 哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站， 哈尔滨 150076） 摘要：[ 目的] 考察芦笋多糖对S180 小鼠红细胞膜组分及流动性的影响。[方法] 芦笋多糖对S180 小鼠腹腔注射给药 7 d ，应用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定小鼠红细胞膜带3 蛋白及血型糖蛋白A 的相对含量，采用试剂盒测定红细胞膜磷 脂、胆固醇和唾液酸含量，荧光偏振法结合探针 1，6－二苯－1、3、5 己三烯测定红细胞膜流动性。[结果] 芦笋多糖能增 加S180 小鼠红细胞膜表面带3 蛋白、血型糖蛋白A 的含量；升高S180 小鼠红细胞膜磷脂含量，降低胆固醇含量；增加 S180 小鼠红细胞膜表面唾液酸含量；提高S180 小鼠红细胞膜流动性。[结论] 芦笋多糖可以改善S180 小鼠红细胞膜组分的 异常变化，从而保持细胞膜的流动性，恢复红细胞的结构和功能。 关键词：芦笋多糖；红细胞膜；细胞膜流动性 中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672-1519(2009)06-0479-04 细胞膜以液态的脂质双分子层为基架，脂质主 S180 （黑龙江省肿瘤医院）。 要是磷脂和胆固醇，磷脂排列成双分子层，蛋白质通 1.3 实验仪器 离心机（北京医用离心机厂），低温 过非共价键与其结合，构成细胞膜的主体。当机体 高速离心机（Beckman Coulter），电泳仪（美国，Bio－ 处于病理状态时，细胞膜的结构和功能发生变化，膜 Rad），凝胶成像系统（美国，Bio－Rad），电热恒温水 脂质流动性的变化是其直观的体现。前期实验表明， 浴锅（北京长安科学仪器厂），紫外－可见分光光度 芦笋多糖对S180 小鼠有增强免疫功能和抗肿瘤的作 计（上海第三仪器厂），荧光分光光度计（日本岛津）。 [1-3] 用 。在此基础上，实验主要研究芦笋多糖对S180 小 2 实验方法 鼠红细胞膜组分中磷脂和胆固醇，带3 蛋白和血型 2.1 实验分组 小鼠随机分成5 组，每组10 只，分 糖蛋白A ，以及唾液酸等含量的影响，并检测其对流 别为正常对照组，阴性对照组，芦笋多糖低、中、高剂 动性的影响，从而进一步考察其对红细胞膜功能的 量组。 影响。 2.2 实验动物模型制作方法 无菌条件下抽取接 1 实验材料 种第7 d 的生长良好的S180 荷瘤小鼠腹水（活癌细胞 1.1 药物试剂 芦笋多糖（哈尔滨商业大学生命科 数＞97％），无菌生理盐水1∶4 稀释，按0.2 mL/只（细 学与环境科学研究中心提供，含量79．14％）；丙烯酰 胞浓度约2×1010 个/L），无菌操作小鼠右前腋皮下 胺，甲叉双丙烯酰胺，三羧甲基氨基甲烷，甘氨酸，十 接种。 二烷基硫酸钠，甘油，β－巯基乙醇，溴酚蓝，过硫酸 2.3 给药剂量、途径及观察方法 芦笋多糖高剂量 铵，四甲基乙二胺，考马斯亮蓝R－250，甲醇，冰醋 组 100 mg/ （kg ·d），中剂量组50 mg/ （kg ·d），低剂量 酸；蛋白定量试剂盒、磷脂测定试剂盒、胆固醇测定 组25 mg/ （kg ·d），阴性对照组和正常对照组给同体 试剂盒、唾液酸测定试剂盒（南京建成生物工程研究 积生理盐水。于接种24 h 后开始无菌操作腹腔注射 所）；DPH （Sigma 公司）。 给药，每只小鼠0.2 mL/次，1 次/d ，连续给药7 d ，停 1.2 实验动物及瘤株