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王华翌-Autophagy Cell Death-PDF1by 恽枫林溶酶体lysosome溶酶体：单层膜，大小不定，来源于高尔基体primary lysosome:直径约0.2~0.5um膜厚7.5nm，内含物均一，无明显颗粒，是高尔基体分泌形成的。含有多种水解酶，但没有活性，只有当溶酶体破裂，或其它物质进入，才有酶活性。其水解酶包括蛋白酶，核酸酶、脂酶、磷酸酶、硫酸酯酶、磷脂酶类，已知60余种，这些酶均属于酸性水解酶，反应的最适PH值为5左右，溶酶体膜虽然与质膜厚度相近，但成分不同，主要区别是：①膜有质子泵，将H+泵入溶酶体，使其PH值降低。②膜蛋白高度糖基化，可能有利于防止自身膜蛋白降解。secondary lysosome：是初级溶酶体与细胞内的自噬泡或异噬泡融合形成的进行消化作用的复合体，分别称之为自噬溶酶体和异噬溶酶体。溶酶体酶现已知各类细胞的溶酶体中约含60种酶，包括蛋白质、糖类、脂类等物质的水解酶类，如酸性磷酸脂酶、组织蛋白酶、核糖核酸酶以及芳香基硫酸脂酶A和B等。各类溶酶体所含水解酶也有所不同，大多数溶酶体里的酶是糖蛋白，但也有例外，如鼠肝细胞和肾细胞溶酶体里的酶大部分是脂蛋白。主要是酸性水解酶，最适pH5.0能降解所有主要的生物分子：如1.将DNA,RNA降解成核苷酸2.将蛋白质降解成氨基酸3.利用磷酸酶从核苷酸和磷脂上去除磷酸基团4.将碳水化合物和脂类降解成更小单位的分子由于溶酶体膜的内表面也带负电荷，溶酶体内的酶处于游离状态，这有利于预防溶酶体自身被消化。溶酶体膜上的质子泵 V 型 H+-ATP 酶利用水解 ATP 产生能量，将细胞质中的 H+转运入溶酶体，引起 pH 值下降，从而维持溶酶体内的酸性环境。溶酶体内的 pH 为3.5~5.5，酶促反应的最适 pH 为 5.0。溶酶体的这种酸性微环境有利于保持酸性水解酶的活性和水解过程，调节生物大分子跨溶酶体膜的转运。如果溶酶体内的 H+漏出， H+的跨膜浓度梯度下降，可破坏其他离子的通透平衡，导致溶酶体膜渗透性稳定障碍。除 H+-ATP 酶外，溶酶体膜上有多种转运蛋白，能将有待降解的生物大分子转运入溶酶体，并将酸性水解酶的降解产物转运出溶酶体，供细胞重新利用或排出细胞外。自噬概念细胞自噬是细胞将自身一些蛋白质和细胞器包裹在特定的膜结构中，送入溶酶体( 酵母的液泡)降解，产生能量和小分子，如氨基酸等供细胞再次利用的过程。这对细胞耐受饥饿，清除胞内错误折叠的蛋白质和受损衰老的细胞器，维持内部稳态至关重要。自噬（Autophagy），是一个涉及到细胞自身结构通过溶酶体机制而被分解的过程。这是一个受到紧密调控的步骤，此步骤是细胞生长、发育与稳态中的常规步骤，它帮助细胞产物在合成、降解以及接下来的循环中保持一个平衡状态。自噬的作用1、维持自身稳态2、去除错误折叠的蛋白或蛋白质聚集体，清除受损的细胞器3、在饥饿时期提供营养4、帮助机体的防御（降解外来病原体）5、促进胚胎的正常发育（婴儿的手掌发育）6、应激反应自噬分类1、巨自噬(macroautophagy)2、微自噬(microautophagy)3、分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy)巨自噬的特征是有独特的双层膜结构——自噬体形成，自噬体包被胞质成分，如蛋白质聚集体，损伤或者衰老的线粒体、过氧化物酶体等，最终与溶酶体融合。微自噬则是溶酶体内陷，包裹部分胞质进入溶酶体，没有独立的双层膜自噬体形成。分子伴侣介导的自噬则是由特定蛋白 Hsc70 等介导，具有选择性。非选择性巨自噬的发生过程(1) 自噬体形成起始步骤，在酵母细胞中是特异结构 PAS(pre-autophagosomal structure, 自噬体的前体结构 )的形成并招募其他 Atg 蛋白和囊泡等膜成分定位，在哺乳动物细胞中是欧米茄体和分离膜形成杯状结构；(2) 自噬体的双层膜在多个 Atg 蛋白的调控下扩展、延伸、包裹各种胞内组分；(3) 双层膜在 Atg蛋白等帮助下延伸和封闭，形成自噬体；(4) 自噬体的外膜与溶酶体或者酵母的液泡发生融合，该特异结构称为自噬溶酶体，而内膜和内含物则被溶酶体内酯酶和蛋白酶降解为小分子；(5) 自噬溶酶体会在 Clathrin、 Kif5b、 Dynamin 等膜相关蛋白质帮助下产生细管状结构，通过自噬性溶酶体再生形成新的溶酶体。自噬前体(PAS):为游离双层膜结构, 两层膜之间的内腔无明显的有形成分, 透射电镜下电子密度很低。自噬前体多呈新月形或半环形, 新月形自噬前体较短而内腔较宽。随着自噬前体不断延长和增大曲度, 内腔明显变窄。1、Atg1/ULK1激酶复合体Atg1/ULK1 的激酶复合体在酵母和高等哺乳动物细胞都有类似的作用。 Atg1 蛋白复合体的核心组成是 A