流通式化学发光植物组织传感器测定过氧化氢.PDF

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究简报 第 10 期 　　　　　　 　 　 　　 　　　　 　 　 　　　　 2003 年 10 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1240～1243 流通式化学发光植物组织传感器测定过氧化氢 瞿　鹏　李保新　章竹君 ( 陕西师范大学化学与材料科学学院 ,西安 710062) 摘 　要 　基于土豆组织中过氧化物酶对 H O Luminol 体系的催化作用 ,设计出一种简便、快速、灵敏度高的流 2 2 通式化学发光植物组织传感器。该传感器的线性响应范围为 1. 0 ×10- 6 ～1. 0 ×10- 3 molL ;检出限为 4 ×10- 7 molL ;对 1. 0 ×10- 6 molL 的过氧化氢进行 11 次连续测定 ,相对标准偏差为 2. 4 % 。从取样到测定的全部分析 过程只需 1. 5 min 。作为分子识别的组织柱 ,可连续使用 400 次以上 ,保存期为 3 周。方法已成功地应用于水 样中过氧化氢的测定。 关键词 　化学发光 ,植物组织传感器 ,过氧化氢 1 　引　　言 过氧化氢是许多氧化酶催化反应的产物 ,通过测定过氧化氢 ,可以间接测定许多底物或酶的含量。 可见 ,过氧化氢的测定在食品检验、药物分析和环境检测等方面都有很重要的意义。目前常见的测定过 氧化氢的方法有 :分光光度法1 ,2 、荧光法3 ,4 、电化学法5 ,6 和化学发光法7 ,8 。 组织传感器具有制作简单、稳定性好、价格便宜、取材容易及易于推广应用等优点。在已报道的组 织传感器中 ,绝大多数是电流型的电化学传感器9 ,10 。由于组织电极上生物材料的固定量极少 ,故其生 物催化活性不会太高 ,对分析物的转化率低 ,从而使这类传感器的灵敏度不高 ,线性范围不宽 ;这些生物 传感器均为静态分析 ,在静态响应过程中 ,底物需扩散到生物催化层中进行反应 ,而且反应产物需扩散 到电极表面 ,一般需要较长的时间才能达到稳态响应 ,故不适合进行在线实时分析 ;此外 ,现行的这类生 物传感器的制作工艺比较复杂、费时。 测定过氧化氢的化学发光流通式传感器也已有文献报道 ,其中大多数是基于固定化酶11 , 。本文基 于土豆组织中过氧化物酶对 H O Luminol 体系的催化作用提出了一种新型的植物组织化学发光流通式 2 2 传感器。该传感器具有许多优点 :传感器不受物质扩散通过膜的动力学因素的影响 ,酶催化反应的产物 不需要通过膜到达检测器的内表面 ,大大加快了响应速度 ; 由于用高灵敏度的化学发光法检测,该传感 器的灵敏度得到了提高 ;大量的土豆组织固定在一根柱子中 ,从而提高了传感器的灵敏度 ;结合流动注 射分析技术 ,传感器的响应时间大大缩短 ,提高了分析效率。 2 　实验部分 2. 1 　仪器、试剂和材料 ( ) ( BPCL 超微弱化学发光仪 中国科学院生物物理研究所 ; CR105 光电倍增管 日本 Hamamatsu 公 ) ( ) 司 ;PHS3C 酸度计 上海第二分析仪器厂 。 过氧化氢储备液 0. 100 molL ,量取 5. 5 mL 30 %( VV) ( 的过氧化氢