滋肾调冲法对大鼠外周血内皮祖细胞影响的试验研究-天津中医药大学.pdfVIP

20 11 年12 月第28 卷第6 期 天 津 中 医 药 Dec． 2011,Vol．28 No．6 Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine 493 滋肾调冲法对大鼠外周 血内皮祖细胞影响的实验研究* 1 2 1 3 1 1 4 1 宋春敬 ，刘晓帆 ，孙艳明 ，李广斌 ，陈 静 ，李海霞 ，李瑞环 ，王 玲 （1.天津中医药大学，天津 300193 ；2. 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所 血液病医院，天津 300020；3.天津市胸科医院，天津 300051 ；4.天津市大港医院，天津 300270） 摘要：[ 目的] 观察滋肾调冲法代表方功血宁Ⅱ号方对骨髓单个核细胞移植大鼠外周血内皮祖细胞（EPCs）数量的 137 影响，探讨该法对骨髓EPCs 的动员作用。[方法] 受鼠雌性大鼠经 Cs 全身照射后，从尾静脉输注雄性大鼠标记4 ′， 6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）荧光的骨髓单个核细胞。受鼠随机分为移植对照组、功血宁Ⅱ号组和乌鸡白凤丸组，另 取未照射大鼠尾静脉输注等量培养液为假孕对照组。骨髓移植24 h 后各组给予相应药物或等容积的生理盐水。受鼠造 血重建后，各组均制备假孕模型。在黄体早中晚期各组处理 1/3 数的大鼠，眼内眦取血，流式细胞术检测外周血EPCs 的数量。血液涂片，荧光显微镜观察DAPI 标记细胞的分布。[结果] 荧光显微镜下显示，移植各组黄体各期血液涂片可 见DAPI 标记细胞，且早期数量为多，功血宁Ⅱ号组尤为明显。各组黄体早期外周血EPCs 数目最多，中期略有下 降，晚期明显减少（P ＜0.05 或P ＜0.01）。功血宁Ⅱ号组、乌鸡白凤丸组黄体各期EPCs 数目较假孕对照组显著增多 （P＜0.05 或P＜0.01）；功血宁Ⅱ号组早期较移植对照组和乌鸡白凤丸组显著增多（P＜0.05）。[结论] 滋肾调冲法能够动 员骨髓EPCs ，提高外周血中EPCs 数量，对EPCs 进一步归巢至卵巢黄体，促进黄体血管新生具有重要作用。 关键词： 滋肾调冲法；功血宁Ⅱ号方；动员；内皮祖细胞；骨髓单个核细胞 中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672-1519(2011)06-0493-04 内皮祖细胞（EPCs）是内皮细胞的前体细胞。 髓中的EPCs 动员出来向外周血迁移，进而参与黄 [1] 1997 年Asahara 等 最先研究发现成年个体外周血 体的血管新生。为此本研究以同种异体骨髓单个核 中存在骨髓来源的血管EPSs ，能够参与生后血管再 细胞移植的假孕动物模型为研究对象，观察功血宁 生过程。EPCs 主要定居于骨髓，一般状态下外周血 Ⅱ号方对动物外周血EPCs 数量的影响，探讨其对 液中EPCs 的数量很少，在月经和妊娠等生理状态 骨髓EPCs 的动员作用。 下或血管损伤、组织缺血等病理状态下，EPCs 能够 1 材料与方法 被动员出骨髓，向外周血迁移，增加外周血中EPCs 1.1 实验材料 的数量，并进一步归巢到血管新生组织，形成新的 1.1.1 实验动物 清洁级Wistar 雄性大鼠为供鼠， 血管。卵巢黄体是发生生理性血管新生少数几个成 共48 只，体质量200～220 g 。清洁级Wistar 雌性大 年组织之一，黄体血管新生与黄体功能密切相关， 鼠为受鼠，共174 只，体质量180～200 g ，由天津实 已有研究发现骨髓来源的EPCs 参与黄体的血管新 验动物中心提供。 [2] 生 。滋肾调冲法是治疗黄体功能不全性功血的治