一种检测马尔尼菲青霉菌实时荧光定量pcr方法-现代生物医学进展.pdfVIP

现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.14 NO.7 MAR.2014 1247 doi: 10.13241/ki.pmb.2014.07.011 一种检测马尔尼菲青霉菌实时荧光定量PCR 方法 的建立和应用* 钟华敏 谢永强 邓秋连 黄莲芬 钟玉葵 (广州市妇女儿童医疗中心检验科 广东广州510120) PCR 。 5.8S rRNA PCR 摘要 的：建立一种检测马尔尼菲青霉菌的实时荧光定 的方法 方法：针对马尔尼菲青霉菌 设计特异性 , SYBR Green Ⅰ PCR , 。 引物采用核酸荧光染料 进行实时荧光定 检测，探讨该方法的灵敏度和特异性并进行临床样品检测验证 , 10 /mL ， 结果：该方法的特异性较好与该菌属内的其他细菌间无交叉反应；灵敏度可检测出 个细胞 全血，在检测范围内线性良好 2 R =0.981 。 ： ，灵敏度高，操作简单，检测时间短；临 相关系数 。临床样品检测和传统的培养方法结果完全相符 结论 该方法特异性好 床样品检测具有很好的准确性，从本研究的结果显示实时荧光定 PCR 方法在检测马尔尼菲青霉菌中的应用可以大大缩短临床 的诊断时间，提高临床诊断的准确度和效率。 关键词：马尔尼菲青霉菌；实时荧光定 PCR ；荧光染料 Q93-33 A 1673-6273 2014 07-1247-03 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Development and Application of a Quantitative Real-Time PCR Assay for Detection of Penicillium Marneffei* To develop a quantitative Real-Time PCR assay for detection of penicillium marneffei. A pair of PCR primers of penicillium marneffei 5.8S rRNA was designed, and Real-Time PCR assay with SYBR Green Ⅰfluorescent dye was performed. Specificity and sensitivity of the assay were verified. The accuracy of the assay was verified, and clinic samples were detected with the PCR assay. The PCR assay was specific to penicillium marneffei, and it had not cross-react with other strai