在载脂蛋白e基因敲除小鼠和人脐静脉平滑肌细胞-中国动脉硬化杂志.pdfVIP

在载脂蛋白e基因敲除小鼠和人脐静脉平滑肌细胞-中国动脉硬化杂志.pdf

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CN43鄄1262/ R摇 中国动脉硬化杂志2013年第21卷第9期 785 [文章编号]摇 1007鄄3949(2013)21鄄09鄄0785鄄06 ·实验研究 · 在载脂蛋白E基因敲除小鼠和人脐静脉平滑肌细胞中 同型半胱氨酸对 B1和Alu重复序列甲基化的影响 1 2 3 3 3 3 1 1,4 吴 凯 ,马胜超 ,孙炜炜 ,王 菊 ,曹成建 ,马长剑 ,杨安宁 ,姜怡邓 (宁夏医科大学1.基础医学院,3.检验学院,4.总医院,宁夏银川市750004; 2.四川大学华西基础与法医学院,四川省成都市610041) [关键词]摇 B1和Alu重复序列;摇 甲基化;摇 同型半胱氨酸;摇 载脂蛋白E基因敲除小鼠;摇 血管平滑肌细胞 [摘摇 要]摇 目的摇 观察同型半胱氨酸对载脂蛋白E基因敲除小鼠不同组织和人脐静脉平滑肌细胞中B1和Alu序 列甲基化水平的影响,为进一步阐明同型半胱氨酸致动脉粥样硬化形成的分子机制提供理论和实验依据。 方法摇 复制高同型半胱氨酸血症载脂蛋白E基因敲除小鼠模型,给予不同饮食 14 周后,分别取小鼠心脏组织、血管及白 细胞;原代培养人脐静脉平滑肌细胞,用50、100、200 及500 滋mol/ L 同型半胱氨酸干预培养72 h后,抽提组织、白 细胞及平滑肌细胞的基因组DNA,采用巢式降落式甲基化特异性PCR法分别检测不同组织和细胞中B1和Alu 序 列甲基化水平的变化。 结果摇 饲以高蛋氨酸饮食的载脂蛋白E基因敲除小鼠心脏组织、血管和白细胞中B1重复 序列甲基化水平下降明显,与正常对照组比较有显著性差异(P0.05和P0.01);在同型半胱氨酸干预的平滑肌 细胞中Alu序列甲基化水平下降显著(P0.05和P0.01)。 结论摇 同型半胱氨酸引起B1和Alu序列低甲基化 改变可能是其导致动脉粥样硬化发生发展的重要机制之一。 [中图分类号]摇 R363 [文献标识码]摇 A Effect ofHomocysteineontheMethylationStatusofB1andAluRepetitiveSequences -/ - in ApoE Mice and Human Vascular Smooth Muscle Cells 1 2 3 3 3 3 1 WU Kai ,MA Sheng鄄Chao ,SUNWei鄄Wei ,WANGJu ,CAOCheng鄄Jian ,MA Chang鄄Jian ,YANGAn鄄Ning ,JIANG Yi鄄Deng1,4 (1.School of Basic Medical Sciences,3. Laboratory medicalcollege,4.GenenalHospital,NingxiaMedical University,Yin鄄 chuan,Ningxia750004,China;2. West ChinaSchoolof PreclinicalandForensicMedicine,Sichuan University,Chengdu, Sichuan610041,China) [KEY WORDS]摇 B1 and Alu Repetitive Sequences;摇 Methylation;摇 Homocysteine;摇 ApoE-/ - Mice;摇 Vascular Smooth Muscle Cel

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