家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变位点-生理学报.pdfVIP

566 生理学报 Acta Physiologica Sinica , October 25, 2004, 56 (5): 566-572 研究论文 家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变位点 的鉴定 1 1 1,* 2 1 1 1 1 1 1 刘燕荣 , 陶谦民 , 陈君柱 , 陶 明 , 郭晓纲 , 尚云鹏 , 朱建华 , 张芙荣 , 郑良荣 , 王兴祥 1浙江大学医学院附属第一医院心内科暨心血管病研究所, 杭州 310003; 2 中国科学院华大基因和生物信息研究所, 北京 100023 摘 要: 家族性高胆固醇血症(hypercholesterolemia familial, FH)是由于低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor, LDLR) 基因突变导致的常染色体显性遗传性疾病, 临床上表现为多发黄色瘤、高水平血浆LDL 、早发性冠心病及有阳性家族史。 本研究通过临床症状结合血脂测定诊断出一个 FH 家系, 其纯合子 FH 患者的血浆总胆固醇水平高达 19.05 mmol/L, LDL 达 17.06 mmol/L, 并有黄色瘤; 而杂合子FH 患者的血浆总胆固醇水平为7.96 mmol/L, LDL 为5.55 mmol/L, 并有心绞痛症状和黄色 瘤。我们对该 FH 家系患者LDLR 基因的 PCR 扩增 DNA 片段进行测序, 发现纯合子FH 患者LDLR 基因 Exon4 区域内发生了 GAG683GCG 突变, 即编码LDLR 第 683 位的谷氨酸被丙氨酸替换, 而杂合子 FH 患者该位点呈现杂合突变。此基因型与临 床诊断遗传谱完全一致。同时, 利用获得 Epstein-Barr(EB)病毒转化型人永生淋巴细胞株(EBV-Ls)与荧光探针DiI 标记的LDL 结合反应, 再通过流式细胞仪检测结果显示, 具有功能性LDLR 的EBV-Ls 细胞比例, 在纯合子FH 患者(7.02%)和杂合子FH 患 者(62.64%)均比健康对照者(84.69%)低, 纯合子FH 患者LDLR 活性仅为健康对照者的 8.29%、而杂合子FH 患者LDLR 活性 约为健康对照者的 73.96%, 前者呈现非常显著的降低。这些 EBV-Ls 细胞LDLR 的功能变化分析, 有力地支持了该FH 家系 的临床诊断和DNA 测序结果。经查阅最新的UMD-LDLR 完全版证实, 本研究发现鉴定的 GAG683GCG 突变是人LDLR 基因 的新突变位点。 关键词: 家族性高胆固醇血症; 低密度脂蛋白受体; Epstein-Barr 病毒; 永生化淋巴母细胞; 流式细胞仪; 突变位点 中图分类号: Q48; R54 Identification of a novel mutation at the point of low density lipoprotein receptor gene from a subject with familial hypercholesterolemia 1 1 1,* 2 1 1 LIU Yan-Rong , TAO Qian-Min , CHEN Jun-Zhu , TAO Ming , GUO Xiao-Gang , SHANG Yun-Peng , ZHU Jian-Hua1 1 1 1 , ZHANG Fu-Rong , ZHENG Liang-Rong , WANG Xing-Xiang 1 Department of Cardiovascular Dise