家蚕egfr配体的鉴定和验证.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 王菲 等/家蚕EGFR 配体的鉴定和验证 261 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn February 25, 2017, 33(2): 261−271 DOI: 10.13345/j.cjb.160271 ©2017 Chin J Biotech, All rights reserved ·农业生物技术· EGFR 王菲，董世峰，宋亮，夏庆友 400716 , , , . EGFR . , 2017, 33(2): 261–271. Wang F, Dong SF, Song L, et al. Identification and characterization of epidermal growth factor receptor ligands in Bombyx mori. Chin J Biotech, 2017, 33(2): 261–271. 摘 要: 表皮生长因子受体 (EGFR) 是广泛存在于后生动物中的多功能受体，其配体的种类、活化方式、配 体与EGFR 之间的相互作用以及激活的信号通路在哺乳动物中研究得较为深入。而非脊椎动物中，EGFR 配体 在各物种间差异较大，目前缺乏对除果蝇以外的其他昆虫 EGFR 配体的认识。通过同源比对、结构域预测、 mRNA 翻译起始序列分析和系统进化树构建，在家蚕中鉴定到 2 个 EGFR 的配体，命名为 BmEGF-1 和 BmEGF-2 。BmEGF-1 与果蝇Spitz 有较高的同源性和一致的Rhomboid 识别序列，BmEGF-2 为Vein 的同源分 子。经原核表达和纯化获得了BmEGF-1 胞外区段，利用 Sf9 细胞分泌BmEGFR 胞外区段，并通过pull-down 实验验证了两者之间存在相互作用。在BmE 细胞中表达BmEGF-1 后，通过 Western blotting 检测到 ERK 和 p38 MAPK 的磷酸化水平增强，说明其不仅能激活经典的ERK 信号通路，还可能通过p38 MAPK 信号通路参 与其他生理过程，为进一步研究EGFR 配体在家蚕中的生物学功能提供了参考。 : 家蚕，表皮生长因子受体，配体，蛋白互作，信号通路 Identification and characterization of epidermal growth factor receptor ligands in Bombyx mori Fei Wang, Shifeng Dong, Liang Song, and Qingyou Xia State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China Abstract: Epidermal growth factor receptor (EGFR) is a multi-functional receptor distributed throughout the metazoa. Study on its ligands so far remained mainly on mammals, including how ligands are processed into active forms, their Received: July 18, 2016; Accepted: September 20, 2016 Supported by: National Basic Research Program of China (973 Pr