苹果赤霉素氧化酶1mdga3ox1启动子区的克隆及序列分析.pdfVIP

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2018-08-19 发布于天津
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苹果赤霉素氧化酶1mdga3ox1启动子区的克隆及序列分析.pdf

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中国农学通报 2012,28(10): 146-150 Chinese Agricultural Science Bulletin 苹果赤霉素3-氧化酶1(MdGA3ox1)启动子区的克隆及序列分析 1 2 1 1 赵慧君，仝宗勇，余海忠，孙永林 1 2 （襄樊学院，湖北襄阳441053 ；中国农业大学，北京100193）摘要：通过研究苹果赤霉素3-氧化酶1(MdGA3ox1) 的启动子来探索MdGA3ox 1 的转录调控机制。采用染色体步移法结合锚定PCR 法扩增了MdGA3ox 1 的上游序列，用PLANT CARE 启动子分析软件分析此启动子序列，并把其构建到载体上，转化入根癌农杆菌中初步验证了其功能。获得一个754 bp 的 DNA 序列，分析此序列发现有CAATbox、TATAbox、赤霉素、光、乙烯、脱落酸等顺式反应元件。把此序列构建到pCAMBIA 1381 载体上，并把此质粒命名为p 1381-GA3ox1p 。把p 1381-GA3ox1p 转化入农杆菌EHA 105 中，利用GUS 染色液染色，农杆菌呈蓝色。获得了MdGA3ox 1 的上游序列，此序列上含有与 GA 调节相关的顺式反应元件，并且初步证明此序列具有启动子活性。关键词：MdGA3ox1；启动子区；克隆；序列分析中图分类号：Q785 文献标志码：A 论文编号：2011-3324 Cloning and Sequence Analysis of Promoter Region of Apple (Malus × demestic) Gibberellin 3-oxidase1 1 2 1 1 Zhao Huijun , Tong Zongyong , Yu Haizhong , Sun Yonglin 1 2 ( Xiangfan University , Xiangyang Hubei 441053; China Agricultural University, Beijing 100193) Abstract: The aim was to study the transcription regulation mechanism of MdGA3ox 1 gene by studying the promoter region of MdGA3ox 1 gene. The upstream sequence of ‘Fuji ’(Malus × domestica Borkh. ‘Fuji ’) MdGA3ox1 was attained by Genome Walking binding anchored PCR. The functional elements were analyzed by PLANT CARE. The sequence was inserted into the vector and transformed into agrobacterium to verify the function preliminaril