白细胞介素-8对缺氧脐静脉内皮细胞存活凋亡的-国家心血管病中心.pdfVIP

1216 中国循环杂志 2015 年 12 月 第 30 卷 第 12 期（总第 210 期）Chinese Circulation Journal，December，2015，Vol. 30 No.12（Serial No.210） 基础与实验研究 白细胞介素 -8 对缺氧脐静脉内皮细胞存活、凋亡的影响及机制 谢启应，杨天伦，孙泽琳，易军 摘要 目的：通过氯化钴构建缺氧脐静脉内皮细胞模型，探讨白细胞介素 -8（IL-8）对缺氧脐静脉内皮细胞存活、凋 亡的影响及机制。 方法：体外培养脐静脉内皮细胞加入不同浓度氯化钴或 IL-8 孵育，检测细胞存活率。正常或缺氧内皮细胞加 入 IL-8 或同时加入 IL-8 抗体 / 蛋白激酶 B（Akt）抑制剂 LY294002 孵育 48 h，采用四唑盐比色法检测细胞存活率； 用流式细胞术连接素 V- 异硫氰酸荧光素 / 碘化丙锭（Annexin V-FITC/ PI）双染标记法检测细胞凋亡；蛋白免疫印迹 ser9 ser9 法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 -3（caspase-3）、磷酸化 Akt（pAkt）和磷酸化糖原合成酶激酶 3β （pGSK-3β ） 蛋白表达。 结果：低浓度氯化钴（50，100 μmol/L）孵育人脐静脉内皮细胞株（HUVECs） 12 h 可促进细胞增殖（P 0.01）； 而高浓度氯化钴（200，400 μmol/L）孵育 24 h 和 48 h 则均明显减少内皮细胞存活。10、50 和 100 ng/ml 的 IL-8 分 别孵育内皮细胞 48 h 和 72 h 均可明显改善缺氧对脐静脉内皮细胞存活率的影响，细胞存活增加（P 0.01）。10 ng/ ml 的 IL-8 可显著抑制正常和缺氧细胞的凋亡和下调 caspase-3 水平，上调 pAkt 和 pGSK-3βser9 水平（P 0.01）；而 LY294002 或 IL-8 抗体均可拮抗 IL-8 的上述作用（P 0.01）。 ser9 结论：IL-8 可通过下调 caspase-3 水平，上调 pAkt 和 pGSK-3β 水平，从而抑制缺氧内皮细胞的凋亡、促进 细胞存活。 关键词 白细胞介素 8；内皮细胞；蛋白激酶类 Effect and Mechanism of Interleukin-8 on Survival and Apoptosis of Hypoxic Human Umbilical Vein Endothelial Cells XIE Qi-ying, YANG Tian-lun, SUN Ze-lin, YI Jun. Department of Cardiology, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha (410008), Hunan, China Corresponding Author: YI Jun, Email: yjwx0312@163.com Abstract Objective: To investigate the effect of interleukin-8 (IL-8) on survival and apoptosis of hypoxic human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) with its mechanisms. Methods: Hypoxic HUVECs were induced by CoCl2 . HUVECs were cultured with differe