猪瘟疫苗质量与免疫效果评价-时凯.pptVIP

猪瘟疫苗质量与免疫效果评价 时凯 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 猪瘟和猪瘟病毒 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种烈性传染病 猪瘟病毒属于黄病毒科瘟病毒属，与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)存在血清学交叉反应 Npro C Erns E1 E2 p7 NS2 NS3 NS4A NS4B NS5A NS5B COOH NH2 结构蛋白 非结构蛋白 猪瘟疫苗的种类 原代细胞苗 传代细胞苗 E2亚单位苗 活载体疫苗（腺病毒载体、BVDV载体、嵌合病毒载体） 生产疫苗的原材料 种毒（猪瘟兔化弱毒株=C株） 细胞（原代牛睾丸细胞、ST细胞、SK6等） 牛血清 培养基 冻干保护剂 袁庆志研究员 (1921－1988) 周泰冲研究员 (1916－1987) 影响猪瘟疫苗质量的因素 疫苗含量（病毒滴度）：兔体发热法检测，≥750 RID；定量RT-PCR法，≥7.5?105拷贝 牛血清（潜在的过敏原、外源病毒的主要来源） 污染物：外源病毒（如BVDV/PCV）、支原体、细菌等 运输保存（冷链运输、低温保存） BVDV或BVDV抗体? C株 FBS 影响猪瘟疫苗免疫效果的因素 猪瘟母源抗体干扰（首免日龄） 疫病感染影响（如蓝耳病、BVDV感染） 其他疫苗干扰（如蓝耳病活疫苗） 免疫抑制剂（霉菌毒素、抗生素、皮质激素等） 营养（蛋白质、特定氨基酸、酶等） 应激（寒冷、高温、高湿、脱水、废气、噪音、拥挤、断奶、断尾等） 猪瘟母源抗体消长规律 猪瘟疫苗免疫效果评估 免疫攻毒（实验室评价） 抗体水平：母猪/公猪抗体水平、哺乳仔猪母源抗体水平、断奶仔猪免疫抗体水平 细胞免疫应答：需要用特殊方法检测 猪群中有无临床病例和特征病变 种猪野毒带毒情况（?1%） 群体健康状况和生产成绩 抗体检测方法 血清中和试验（保护性中和抗体滴度，≥1:50） 间接ELISA（工程中心有售） IDEXX阻断ELISA（阳性：阻断率≥40%） 免疫失败的原因分析 动物本身（发病、营养不良、日龄……） 疫苗本身（滴度不够、失真空、有效期、稀释液……） 免疫程序（母源抗体干扰、其他疫苗干扰、剂量……） 防疫人员（知识、责任心、注苗要领……） 成功的免疫=正确的人+正确的疫苗+正确的时间+正确的动物 对疫苗的正确认识 疫苗不是万能的，它只是疫病防控的最后一道防线（第一道防线：生物安全、环境控制、饲料营养、饲养管理等） 疫苗不是保健品，不是治疗药，也不是安慰剂 疫苗不是绝对安全的（妊娠母猪、新生仔猪、公猪、老弱病残猪），最低有效剂量?使用剂量?最大安全剂量 学点免疫学常识，科学安排疫苗的免疫时机、剂量、次数和间隔 疫病防控的正确理念 传染病流行过程：传染源?传播途径?易感动物 预防为主，防重于治。圣人不治已病而治未病，不治已乱而治未乱。扁鹊三兄弟的故事：上工治未病，中工治欲病，下工治已病 猪瘟防控的关键：种猪净化，清除带毒母猪 现地防疫的误区 主次不分，胡子眉毛一把抓---重大疫病与次要疾病的关系（防疫重点和层次） 过度免疫，疫苗免疫越多越好吗？抗体水平越高越好吗？动物的免疫资源和潜能是无限的吗？---防疫和生产的关系 舍本逐末，捡了芝麻丢了西瓜---非特异性免疫和特异性免疫的关系（固本培元，不要滥用抗生素） 华而不实，片面追求“漂亮”数据---群体免疫与个体免疫的关系（≥70-80%免疫保护） 猪瘟疫苗的作用和局限性 猪瘟疫苗能、并且只能预防猪瘟（“一苗防一病”），一般情况下非常安全，对不同基因型都同样有效 现有的猪瘟疫苗很难区分疫苗接种和野毒感染（病毒可以区分，但抗体不好区分） 易受母源抗体的干扰，BVDV的干扰，其它疫苗的干扰 偶尔会有过敏反应 新型嵌合载体猪瘟疫苗 嵌合载体疫苗可以诱导消除性免疫和完全保护，免疫效果接近于C株 嵌合载体疫苗对猪只、家兔、小鼠安全 嵌合载体疫苗以较低的免疫剂量或一次免疫可以诱导完全保护 嵌合载体疫苗一次免疫后3周可以诱导完全保护 嵌合载体疫苗的效力不受猪瘟母源抗体干扰 嵌合载体疫苗不影响伪狂犬病疫苗和蓝耳病疫苗免疫效力 嵌合载体疫苗几乎不产生干扰性抗载体免疫 嵌合载体疫苗的体外培养不受BVDV抗体影响 嵌合载体疫苗可以允许鉴别诊断 Sun Y et al., Vaccine (2011; 2013) 关于伪狂犬病变异株 Bartha-K61株疫苗不能对PRV TJ株提供完全保护； 与SC株相比，TJ株对小鼠和猪致病性明显增强； 全基因组序列分析显示，TJ株多个病毒蛋白出现了大量的特征性变异； 我们构建的双基因缺失病毒rPRVTJ-delgE，对仔猪安全，且能对PRV变异株TJ株的攻击提供快速、