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全国心血管靖实验室诊断与临床专题学术研讨会 大会交流
and，adhesion．Bioehem Res
钮备特异性抗体的抗原．’ migration Biophys
1127--1131．，
使用pET28a(+)载体可选择构建表达天然蛋白的形Commtm，2005，330l
for
method
式，或N端带有His和”标签，或C端带有His标签的融[4]KyteJ，Doolittle陋Asimple displaying。
the characterofa MolBi01．
合蛋白形式．由于Nelin基因是本研究室首次进行表达纯 hydropathie protein．J
105—132．
化。目前尚无可借鉴的纯化方法，因此本研究选择了C端 1982，157I
000 JV，PerlowDS，eta1．Induction
带有6×Hi8标签的表达纯化策略。此标签与GST(26[5]EminiEA，Hughes
．of Avirus avirus
Da)标签相比具有分子量小、免疫原性小、对蛋白的活性影 hepatitis xaeutralizingantibodyby
响小等特点．将Nelin基因的1～133alEI．片段克隆到 specificsyntheticpeptide．JⅥrol-1985，55l 836
‘
--839．
pET28a(+)载体后，经口TG诱导，SDs—PAGE电泳分析
ofchaJll
PA，SehultzG．Predictionflexibility
显示Nelin基因成功的获得了高水平表达，诱导条件优化r6]Karplus
表明诱导时间在2～5h这个范围内以及IPTG的诱导浓 in l 212
度为0．1～2．0mmol／L条件下，表达水平没有明显差别． --213． ‘．
BA，wolfH．The novel
蛋白可溶性分析表明产物为可溶性的蛋白．此蛋白在电泳 [7]Jameson antigenicindex；a
for determinants．
中迁移位置显示。较预测的
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