TGF-β1信号在成纤维细胞促血管生成中作用的研究-中国细胞生物学.PDF

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2016, 38(5): 479–486 DOI: 10.11844/cjcb.2016.05.0388 研究论文 TGF-β1信号在成纤维细胞促血管生成中作用的研究 毛熙贤 王 伟 李德卫* (重庆医科大学附属第一医院肝胆外科, 重庆 400016) 报 摘要 该研究旨在探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)信号在成 纤维细胞促血管生成中的作用。实验通过ELISA检测了Hepa1-6 细胞上清液中TGF-β1的含量。将 胎鼠成纤维细胞分三组, 分别用普通培养液(DMEM/F12组) 、含Hepa1-6 细胞上清液的条件培养 μ β 学 液(Hepa1-6组) 以及加入1 mol/L TGF- 1受体抑制剂(GW788388)的条件培养液(GWHepa1-6组) α- 培养。采用免疫荧光双染法、qPCR检测培养的成纤维细胞中 平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A , VEGFA) 的蛋白质 及mRNA表达水平。采用基质胶(Matrigel)血管形成实验检测成纤维细胞上清液作用下EA.hy 926 学 β 细胞的血管形成能力。ELISA结果显示, 与DMEM/F12相比, Hepa1-6细胞上清液中TGF- 1表达 量明显升高(P0.01)。免疫荧光双染法和qPCR结果显示, 与DMEM/F12组和GWHepa1-6组比较, α P Hepa1-6组成纤维细胞中 -SMA和VEGFA蛋白质及mRNA相对水平明显增加( 0.01), 且在第5 d时 达最高, 其上清液诱导EA.hy 926细胞的血管形成能力明显增强(P0.01)。该研究表明, TGF-β1信 物 α 号通路可以诱导成纤维细胞 -SMA和VEGFA 的表达, 进而促进EA.hy 926细胞形成小管样结构。 关键词 TGF-β1; 成纤维细胞; 肌成纤维细胞; α-SMA; VEGFA; 小管形成 The Role of TGF-β1 Signaling in Fibroblasts of Angiogenesis 生 Mao Xixian, Wang Wei, Li Dewei* (Department of Hepatobiliary Surgery, First Affiliated Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China) 胞 Abstract The aim of this study is to investigate the effect of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) signaling pathway on angiogenesis promoted by fibr