合欢皮总皂苷抗肿瘤作用靶点鉴定与分子机制解析-中国中药杂志.pdfVIP

２０１７年１０月 第４２卷第１９期 Ｖｏｌ４２，Ｎｏ１９ Ｏｃｔｏｂｅｒ，２０１７ 合欢皮总皂苷抗肿瘤作用靶点鉴定与 分子机制解析 １ １ ２ １ １ １ 钱薏 ，韩清华 ，刘丹 ，屠鹏飞 ，曾克武 ，梁鸿 （１北京大学 药学院天然药物与仿生药物国家重点实验室，北京 １００１９１； ２北京大学 医药卫生分析中心蛋白质组学实验室，北京 １００１９１） ［摘要］　合欢皮作为常用中药，临床常用于治疗失眠、焦虑、肿瘤等。现代药理中针对合欢皮总皂苷（ＴＳＡＪ）抗肿瘤活性多有 报道，但由于单体成分分离困难，药理机制难以开展。该研究采用ＭＴＴ法和Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染色法，确认了ＴＳＡＪ对肝癌细胞 的生长抑制作用，构建了表面修饰有ＴＳＡＪ的固相亲合微球，利用该固相微球特异性地从人肝癌细胞裂解液中富集靶点蛋白， 再利用高分辨质谱对富集到的靶点蛋白进行鉴定。采用ＭａｔａｂｏＡｎａｌｙｓｔ３０处理数据，筛选并确定了Ｅｘｐｏｒｔｉｎ２，Ｂｅｔａａｃｔｉｎｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ２，Ｍｙｏｓｉｎ９，ＰｒｏｔｅｉｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｐｒｏｔｅｉｎＳｅｃ６１ｓｕｂｕｎｉｔｂｅｔａ，Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅｃｏｘｉｄａｓｅｃｏｐｐｅｒｃｈａｐｅｒｏｎｅ等５个靶点蛋白。这些蛋白 分别具有调控细胞凋亡及细胞生长、分化、运动等功能，提示ＴＳＡＪ的抗肿瘤机制可能与诱导细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成有 关。综上所述，该研究利用ＴＳＡＪ修饰的固相亲和微球，特异性富集并鉴定了ＴＳＡＪ的靶点蛋白，从靶点源头上解释了ＴＳＡＪ抗 肿瘤作用机制，同时也为中药复杂体系的分子药理机制研究提供了一种全新的思路。 ［关键词］　合欢总皂苷；抗肿瘤；靶点鉴定；信号通路；作用机制 Ａｎｔｉｔｕｍｏｒｔａｒｇｅｔｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｔｕｄｙｏｆ ｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＡｌｂｉｚｉａｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ １ １ ２ １ １ １ ＱＩＡＮＹｉ，ＨＡＮＱｉｎｇｈｕａ，ＬＩＵＤａｎ，ＴＵＰｅｎｇｆｅｉ，ＺＥＮＧＫｅｗｕ ，ＬＩＡＮＧＨｏｎｇ （１ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮａｔｕｒａｌａｎｄＢｉｏｍｉｍｅｔｉｃＤｒｕｇｓ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ， ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９１，Ｃｈｉｎａ； ２ＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＭｅｄｉｃａｌａｎｄＨｅａｌｔｈＡｎａｌｙｓｉｓＣｅｎｔｅｒ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９１，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　ＤｒｉｅｄｓｔｅｍｂａｒｋｆｒｏｍＡｌｂｉｚｉａｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ（ＡＪ）ｉｓａｃｏｍｍｏｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｈｅｒｂｗｉｔｈｓｅｖｅｒａｌｔｈｅｒａｐｙｅｆｆｅｃｔｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｉｎｓｏｍｎｉａ，ａｎｘｉｅｔｙａｎｄａｎｔｉｔｕｍｏｒＲｅｃｅｎｔｌｙ，ｔｈｅａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｔｕｄｉｅｓｏｆＡＪｈａｖｅｄｒａｗｎｍｕｃｈａｔｔｅｎｔｉｏｎ；ｈｏｗｅｖｅｒ， ｔｈｅｒｅａｒｅｓｔｉｌｌｓｏｍｅｔｒｏｕｂｌｅｓｉｎｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈｌｅａｄｓｔｏｔｈｅｄｉｆｆｉｃｕｌｔｉｅｓｉｎｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈｏｆＡＪＩｎ ｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ｗｅｆｉｒｓｔｌｙｃｏｎｆｉｒｍｅｄｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｆｔｏｔａｌｓａｐｏｎｉｎｓｆｒｏｍＡＪ（ＴＳＡＪ）ｏｎｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃａｒｃ