白木香转录因子asmyb1和asmyb2克隆及表达分析-中国中药杂志.pdfVIP

２０１７年９月 第４２卷第１７期 Ｖｏｌ４２，Ｎｏ１７ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２０１７ ·资源与鉴定 · 白木香转录因子ＡｓＭＹＢ１和ＡｓＭＹＢ２克隆及表达分析   冯莹莹，董先娟，刘晓，闫雅如，王金铃，史社坡，王晓晖 ，屠鹏飞 （北京中医药大学 中药学院 中药现代研究中心，北京 １０００２９） ［摘要］　ＭＹＢ类转录因子是数量最多、功能最多样化的转录因子家族之一。该研究根据白木香转录组高通量测序结果设计 引物扩增白木香中ＭＹＢ基因，利用ＲＴＰＣＲ技术从白木香中首次克隆得到２个ＭＹＢ基因ｃＤＮＡ全长，分别命名为ＡｓＭＹＢ１， ＡｓＭＹＢ２，并对ＭＹＢ蛋白质进行跨膜结构分析和聚类分析，预测其生物学信息；利用实时荧光定量ＰＣＲ技术检测ＡｓＭＹＢ基因 在不同组织，及在ＮａＣｌ、低温（４℃）、重金属（ＣｄＣｌ）、干旱（甘露醇）４种非生物胁迫和脱落酸、水杨酸、赤霉素、茉莉酸甲酯４ ２ 种外源激素处理下的表达差异。该研究中克隆获得的ＡｓＭＹＢ１基因全长１０６３ｂｐ，编码３５３个氨基酸；ＡｓＭＹＢ２基因全长１０８１ ｂｐ，编码３５９个氨基酸。２个基因具有组织表达特异性；ＡｓＭＹＢ１，ＡｓＭＹＢ２基因的转录水平受到不同生物胁迫和外源激素的影 响，说明ＭＹＢ基因对白木香防御反应和激素信号传导具有重要的作用。 ［关键词］　白木香；ＭＹＢ基因；表达分析；非生物胁迫；激素处理 ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒＡｓＭＹＢ１ａｎｄ ＡｓＭＹＢ２ｆｒｏｍＡｑｕｉｌａｒｉａｓｉｎｅｎｓｉｓ   ＦＥＮＧＹｉｎｇｙｉｎｇ，ＤＯＮＧＸｉａｎｊｕａｎ，ＬＩＵＸｉａｏ，ＹＡＮＹａｒｕ，ＷＡＮＧＪｉｎｌｉｎｇ，ＳＨＩＳｈｅｐｏ，ＷＡＮＧＸｉａｏｈｕｉ，ＴＵＰｅｎｇｆｅｉ （ＭｏｄｅｒｎＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｆｏｒＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ， ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００２９，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　ＴｈｅＭＹＢｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｃｏｍｐｒｉｓｅｓｏｎｅｏｆｔｈｅｒｉｃｈｅｓｔｇｒｏｕｐｓｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓｉｎｐｌａｎｔｓＴｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｏｆｔｗｏＭＹＢ ｇｅｎｅｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｔｈｒｏｕｇｈｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆＡｑｕｉｌａｒｉａｓｉｎｅｎｓｉｓｃａｌｌｉｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｄａｔａ，ａｎｄｔｈｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎＰＣＲｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｏｂｓｔａｉｎｔｈｅｃｏｒｒｅｃｔｅｄＭＹＢｃｌｏｎｅｓ，ｎａｍｅｄＡｓＭＹＢ１，ＡｓＭＹＢ２．ＴｈｅＭＹＢｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅｄｏｍａｉｎａｎｄｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓ ｗｅｒｅｐｒｅｄｉｃｔｅｄｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｏｆｔｗａｒｅｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓｏｆＭＹＢｐｒｏｔｅｉｎｓＴｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｌｅｖｅｌｏｆＡｓＭＹＢ１，ＡｓＭＹＢ２ｗａｓｐｅｒ ｆｏｒｍｅｄｂｙｒｅａｌｔｉｍｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＲＴＰＣＲｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｉｎｒｅｓｐｏｎｄｓｔｏａｂｉｏｔｉｃｓｔｒｅｓｓｅｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｓａｌｔ，ｃｏｌｄ，ｍｅｔａｌａｎｄｄｒｏｕｇｈｔ ｓｔｒｅｓｓ，ａｎｄｈｏｒｍｏｎｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄ（ＡＢＡ），ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ（ＳＡ），ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎｓ（ＧＡ）ａｎｄｍｅｔｈｙｌｊａｓｍｏ