动物基因组定点整合转基因技术研究进展-遗传.pdfVIP

Hereditas (Beijing) 2017 年 2 月, 39(2): 98 ―109 综 述 动物基因组定点整合转基因技术研究进展 1 1 1 1 1,2 1 李国玲 ，钟翠丽 ，莫健新 ，全绒 ，吴珍芳 ，李紫聪 ， 杨化强1,2 ，张献伟1,2 1. 华南农业大学动物科学学院，国家生猪种业工程技术研究中心，广州 510642 ； 2. 广东温氏食品集团股份有限公司，新兴 527439 摘要 : 传统转基因技术，如显微注射、转座子、慢病毒转染等将目的基因插入基因组内的整合方式是随机的， 这些随机整合对后期转基因动物品系组建和育种带来诸多不利，因此有研究人员提出了定点整合转基因技术。 目前该技术的定点整合效率非常低，主要取决于两个方面：一是靶位点产生DNA 双链断裂(double-strand break, DSB) 的效率；二是断裂后的靶位点与携带同源臂及外源基因的供体质粒发生同源重组的效率，其中同源重组 修复(homologous recombination repair, HDR)是基因组定点整合最为依赖的修复机制。靶位点产生DSB 后，机 体的DNA 修复既可能发生HDR ，也可能发生非同源末端连接(nonhomologous end joining, NHEJ) ，并且两者之 间存在竞争关系，因此激活HDR 或抑制NEHJ 都可提高定点整合转基因的效率。本文结合影响定点整合的因 素，对提高定点整合效率最新探索方面进行了综述。 关键词 : 同源重组修复；定点整合；CRISPR/Cas9 Advances in site-specific integration of transgene in animal genome 1 1 1 1 1,2 1 Guoling Li , Cuili Zhong , Jianxin Mo , Rong Quan , Zhenfang Wu , Zicong Li , Huaqiang Yang1,2, Xianwei Zhang1,2 1. National Engineering Research Center for Swine Breeding Industry, College of Animal Science, South China Agricultural Un i- versity, Guangzhou 510642, China; 2. Guangdong Wens Foodstuff Co., Ltd ., Xinxing 527439, China Abstract : The traditional transgenic technologies, such as embryo microinjection, transposon-mediated integration, or lentiviral transfection, usually result in random insertions of the foreign DNA into the host genome, which could have various disadvantages in the establishment of transgenic animals. Therefore, a strategy for site-specific integra- tion of a transgene is needed to generate genetically modified animals with accurate and identical genotypes. However, the efficiency for site-specific integration of transgene is very low, which is mainly caused by two issues. The first 收稿日期: 2016−11−01; 修回日期: 201